[發明專利]一種布氏桿菌檢出方法

在審

• 申請號: 201810051701.6
• 申請日: 2018-01-19
• 公開（公告）號: CN108456710A
• 公開（公告）日: 2018-08-28
• 發明（設計）人: 劉志軍;崔海霞;秦靜;楊嬌敏;杜宇
• 申請（專利權）人: 濰坊醫學院
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12R1/01
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 王新生

本發明提供了一種布氏桿菌檢出方法，取患者的血液進行布氏桿菌的分離培養，分離培養后使用瑞氏?姬姆薩染色法檢出布氏桿菌。本發明用于檢測血液中的布氏桿菌能夠使結果更加清晰，作為診斷布氏桿菌病的檢測方法，檢出率更高。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體地說，是涉及一種布氏桿菌檢出方法。

背景技術

血培養的陽性瓶檢測細菌傳統染色方法為革蘭氏染色，檢測布氏桿菌也同樣用革蘭氏染色。但是，布氏桿菌因為是革蘭氏陰性桿菌，又由于菌體特別小，所以血培養出來的布氏桿菌在革蘭氏染色方法下并不好發現，為了更好的鑒別布氏桿菌，所以用瑞氏染色進行細菌染色。

發明內容

本發明的目的在于克服上述傳統技術的不足之處，提供一種布氏桿菌檢出方法，能夠提高布氏桿菌的檢出率。

本發明的目的是通過以下技術措施來達到的：一種布氏桿菌檢出方法，使用瑞氏-姬姆薩染色法對布氏桿菌染色檢出。

進一步地，取患者的血液進行布氏桿菌的分離培養，分離培養后使用瑞氏-姬姆薩染色法檢出布氏桿菌。

進一步地，分離培養后制作血涂片，對血涂片染色前進行固定，防止細胞在染色過程中脫落。

進一步地，固定后使用瑞氏-姬姆薩染色法包括以下步驟，

(1)鉛筆作標記，將血涂片平放在染色架上，蠟筆劃線可防液體外溢。

(2)血涂片自然干燥后，滴瑞氏-姬姆薩染液(A液)數滴覆蓋血片，染1分鐘。

(3)滴加稍多體積的緩沖液（B液），用吸耳球將其與染液吹勻，染5分鐘。

(4)慢慢搖動玻片，然后用細的自來水流從玻片的一側沖去染液(不要先倒去染液再沖水),待血片自然干燥后(或用濾紙吸干)，即可鏡檢。

由于采用了上述技術方案，與現有技術相比，本發明的優點是：

用患者的血液進行布氏桿菌的分離培養，瑞氏-姬姆薩染色法分離培養鑒定血液中布氏桿菌法是布氏桿菌病診斷的“金標準”；

用瑞氏-姬姆薩染色法對血涂片進行布氏桿菌的檢測可以更為直觀地判斷布氏桿菌病是否存在，相對于革蘭染色法電鏡下布氏桿菌與背景相比顏色差別較小不容易區分，瑞氏-姬姆薩染色法得到的結果能夠更加清晰被觀察到，顏色區分明顯，在電鏡下很容易觀察；

提高布氏桿菌病的檢出率，作為布氏菌病診斷的依據。

下面結合附圖和具體實施方式對本發明作進一步說明。

附圖說明

附圖1是本發明中瑞氏-姬姆薩染色法得到的布氏桿菌視野下的電鏡圖片。

附圖2是本發明中革蘭染色法得到的布氏桿菌視野下的電鏡圖片。

具體實施方式

如附圖1-2所示，相對于革蘭染色法電鏡下布氏桿菌與背景相比顏色差別較小不容易區分，瑞氏-姬姆薩染色法得到的結果能夠更加清晰被觀察到，布氏桿菌被染成藍紫色，在電鏡下很容易觀察。

取患者的血液進行布氏桿菌的分離培養，分離培養后使用瑞氏-姬姆薩染色法檢出布氏桿菌，分離培養后制作血涂片，對血涂片染色前進行固定，防止細胞在染色過程中脫落。

固定后使用瑞氏-姬姆薩染色法包括以下步驟，

(1)鉛筆作標記，將血涂片平放在染色架上，蠟筆劃線可防液體外溢。

(2)血涂片自然干燥后，滴瑞氏-姬姆薩染液(A液)數滴覆蓋血片，染1分鐘。

(3)滴加稍多體積的緩沖液（B液），用吸耳球將其與染液吹勻，染5分鐘。