[發明專利]一種咖啡酸糖苷類化合物、其制備方法及應用

有效

• 申請號: 201810050338.6
• 申請日: 2018-01-18
• 公開（公告）號: CN108033984B
• 公開（公告）日: 2020-10-20
• 發明（設計）人: 李振杰;朱瑞芝;劉志華;司曉喜;楊光宇;王昆淼;張鳳梅;王文元;王凱;唐石云;申欽鵬;劉春波;蔣薇;尤俊衡;何沛;張玲;蘇鐘璧
• 申請（專利權）人: 云南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C07H1/08
• 分類號: C07H1/08;C07H15/04;A24B15/40;A24B15/26
• 代理公司: 北京市領專知識產權代理有限公司 11590
• 代理人: 楊兵

1.一種咖啡酸糖苷類化合物的制備方法，所述咖啡酸糖苷類化合物具有如下結構：

其分子式為C₁₆H₂₀O₉，命名為：順式-1-O-甲基-6-O-咖啡基-β-D-葡萄糖；所述的咖啡酸糖苷類化合物的制備方法，其特征在于，所述咖啡酸糖苷類化合物以三葉懸鉤子為原料，經浸膏提取、有機溶劑萃取、柱層析和高效液相色譜分離步驟制得，具體步驟為：

(1)浸膏提?。簩⑷~懸鉤子的莖和葉粉碎后用第一溶劑提取，然后除去第一溶劑得到粗提取物；

(2)有機溶劑萃取：將步驟(1)得到的粗提物懸浮于水中，用第二溶劑萃取，然后除去第二溶劑，得到黑色浸膏；將黑色浸膏進行樹脂柱層析，依次用水、甲醇和丙酮洗脫，收集甲醇洗脫液，除去甲醇得到甲醇浸膏；

(3)柱層析：以氯仿與甲醇體積比1:1的混合溶劑溶解步驟(2)得到的甲醇浸膏，然后吸附在200～300目的硅膠上，干法裝柱；以氯仿與甲醇的體積比為1:0,50:1,20:1,10:1,1:1的混合溶劑進行梯度洗脫；收集10:1的洗脫液，除去溶劑得到洗脫樣品A；用甲醇溶解洗脫樣品A，將其吸附在RP-18上，干法柱層析，依次以5v/v％甲醇、70v/v％甲醇、85v/v％甲醇、100v/v％甲醇洗脫，收集5v/v％甲醇洗脫液，除去溶劑得到洗脫樣品B；將洗脫樣品B用氯仿與甲醇體積比13:1的混合溶劑經硅膠柱反復柱層析，再用氯仿與甲醇體積比1:2的混合溶劑經Sephadex LH-20柱層析，得到所述的咖啡酸糖苷類化合物及其反式異構體的混合物；

(4)高效液相色譜分離：經高效液相色譜分離純化步驟(3)得到混合物，即得到所述的咖啡酸糖苷類化合物。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述的第一溶劑為體積濃度為70～100％的甲醇水溶液或體積濃度為90～100％的乙醇水溶液，所述提取為索氏回流提取。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(2)所述的第二溶劑為石油醚。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟(4)所述的高效液相色譜是以21.2×250mm，5μm的Zorbax PrepHT GF反相制備柱為固定相，紫外檢測器檢測波長為278nm；流動相為體積濃度為22％的甲醇水溶液，流速為15～25ml/min，每次進樣10～100μL，收集20min的色譜峰，多次累加后蒸干，即得到所述的咖啡酸糖苷類化合物。