[發(fā)明專利]一種人的酪氨酸蛋白激酶SYK突變蛋白及其應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810042815.4
• 申請(qǐng)日: 2018-01-17
• 公開（公告）號(hào): CN108344873A
• 公開（公告）日: 2018-07-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張耀洲;吳玉乾;馮建華;李冬梅;張樹軍;胖鐵良;陳玉皎;王文雅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津市湖濱盤古基因科學(xué)發(fā)展有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/577;G01N33/574;G01N21/31
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明涉及一種人的酪氨酸蛋白激酶SYK突變蛋白及其應(yīng)用，通過將大量癌癥患者作為研究病例，對(duì)病例進(jìn)行基因檢測(cè)并分析，確定出人的酪氨酸蛋白激酶SYK的突變蛋白，根據(jù)該人的酪氨酸蛋白激酶SYK的突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為癌癥的基因診斷提供指引作用，實(shí)現(xiàn)癌癥的早診斷、早發(fā)現(xiàn)和相關(guān)治療。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種基因工程領(lǐng)域，尤其涉及一種人的酪氨酸蛋白激酶SYK突變蛋白及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

酪氨酸蛋白激酶SYK屬于酪氨酸蛋白激酶復(fù)合體中的一員。酪氨酸蛋白激酶是控制細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的重要蛋白質(zhì)，是在正常細(xì)胞和異常細(xì)胞分裂增殖過程中起重要作用的癌蛋白和原癌蛋白家族中的成員。酪氨酸蛋白激酶是腫瘤細(xì)胞上重要的治療靶點(diǎn)之一，可通過抑制其活性，達(dá)到治療的目的。

人的酪氨酸蛋白激酶SYK發(fā)生突變會(huì)對(duì)人類健康造成影響，研究發(fā)現(xiàn)，在對(duì)某些癌癥(該癌癥包括肺癌、肝癌、胰腺癌和白血病)患者的外周血進(jìn)行基因測(cè)序的過程中，均發(fā)現(xiàn)患者的酪氨酸蛋白激酶SYK發(fā)生了突變，因此，對(duì)人的酪氨酸蛋白激酶SYK突變的檢測(cè)對(duì)判斷人體是否患有癌癥具有一定的指引作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于提供一種人的酪氨酸蛋白激酶SYK突變蛋白及其應(yīng)用。

本發(fā)明技術(shù)方案包括：

第一方面，提供一種人的酪氨酸蛋白激酶SYK突變蛋白，其氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。

第二方面，提供一種人的酪氨酸蛋白激酶SYK突變蛋白的編碼基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

第三方面，提供一種基因芯片，包括：固相載體和固定在該載體上的核苷酸探針；所述核苷酸探針根據(jù)所述人的酪氨酸蛋白激酶SYK突變蛋白的核苷酸序列，與人的酪氨酸蛋白激酶SYK正常蛋白的核苷酸序列的比對(duì)結(jié)果確定。

優(yōu)選地，所述核苷酸探針為SEQ ID NO:3所示的堿基序列。

第四方面，提供一種特異性識(shí)別人的酪氨酸蛋白激酶SYK突變蛋白的單克隆抗體，其編碼的氨基酸序列為SEQ ID NO:1所示。

第五方面，提供一種用于檢測(cè)人的酪氨酸蛋白激酶SYK突變蛋白的抗體的ELISA試劑盒，所述ELISA試劑盒包括：包被有上述單克隆抗體的ELISA酶標(biāo)板、酶標(biāo)二抗、檢測(cè)對(duì)象的酪氨酸蛋白激酶SYK蛋白、樣品稀釋液、包被緩沖液、ELISA酶標(biāo)板洗滌液、顯色液和終止液。

優(yōu)選地，所述酶標(biāo)二抗為稀釋的HRP辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗人IgG。

第六方面，提供一種基于上述任一所述ELISA試劑盒檢測(cè)人的酪氨酸蛋白激酶SYK突變蛋白的抗體的方法，包括：

a、使用所述包被緩沖液對(duì)上述單克隆抗體進(jìn)行稀釋，并將稀釋后的所述單克隆抗體加樣至ELISA酶標(biāo)板的孔中，室溫孵育；

b、使用所述樣品稀釋液將檢測(cè)對(duì)象的酪氨酸蛋白激酶SYK蛋白稀釋成不同濃度梯度，并將不同濃度梯度的酪氨酸蛋白激酶SYK蛋白分別加樣至ELISA酶標(biāo)板的孔中，室溫孵育；

c、甩去各孔中的液體，加入所述ELISA酶標(biāo)板洗滌液，洗滌并甩干；

d、加入所述酶標(biāo)二抗，并室溫孵育；

e、甩去各孔中的液體，加入所述ELISA酶標(biāo)板洗滌液，洗滌并甩干；

f、加入所述顯色液，室溫避光孵育，并加入所述終止液終止反應(yīng)；

g、在酶標(biāo)儀上測(cè)定波長(zhǎng)為450nm處的吸光值。

優(yōu)選地，進(jìn)一步包括：空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)。