[發(fā)明專利]一種單細(xì)胞激光彈射基片、方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810041167.0
• 申請(qǐng)日: 2018-01-16
• 公開（公告）號(hào): CN110042053B
• 公開（公告）日: 2022-07-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 勾洪磊;荊曉艷;籍月彤;徐健
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院青島生物能源與過程研究所
• 主分類號(hào): C12M1/42
• 分類號(hào): C12M1/42;C12M1/00;C12N1/02;C12N1/16;C12N5/09
• 代理公司: 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31266
• 代理人: 王正君;徐迅

1.一種單細(xì)胞激光彈射基片，其特征在于：依次包含基底層和鍍膜層，其中鍍膜層上偶聯(lián)有氨基基團(tuán)或特異性抗體，所述氨基基團(tuán)或特異性抗體用于結(jié)合單細(xì)胞；所述特異性抗體包括單克隆抗體或多克隆抗體，所述單細(xì)胞為細(xì)胞膜完整且活性不喪失的人或動(dòng)物來源的細(xì)胞，所述氨基基團(tuán)或特異性抗體通過共價(jià)反應(yīng)與鍍膜層偶聯(lián)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的單細(xì)胞激光彈射基片，其特征在于：所述基底層材料選自硅酸鹽玻璃、石英玻璃和氟化鈣玻璃中的一種或多種，所述鍍膜層材料選自ITO（氧化銦錫）、FTO（氟摻雜氧化錫）、AZO（鋁摻雜氧化鋅）中的一種或多種。

3.一種液相單細(xì)胞彈射方法，其特征在于：包括以下步驟：

1） 將細(xì)胞懸液滴涂于權(quán)利要求1所述的單細(xì)胞激光彈射基片鍍膜層表面并孵育；

2） 沖洗除去未被結(jié)合的細(xì)胞，并使細(xì)胞始終處于液相環(huán)境中；

3） 利用顯微鏡觀察識(shí)別結(jié)合于單細(xì)胞激光彈射基片上的細(xì)胞，采用脈沖激光進(jìn)行單細(xì)胞彈射使單細(xì)胞脫離單細(xì)胞激光彈射基片表面；

4） 使用接收裝置接收被分離的單細(xì)胞。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的液相單細(xì)胞彈射方法，其特征在于：所述液相環(huán)境為中性等滲溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的液相單細(xì)胞彈射方法，其特征在于：所述孵育的時(shí)間為10-30分鐘。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的液相單細(xì)胞彈射方法，其特征在于：所述觀察識(shí)別包括收集單細(xì)胞拉曼散射信號(hào)或熒光信號(hào)，獲得單細(xì)胞拉曼圖譜或熒光圖像，分析拉曼圖譜或熒光圖像識(shí)別單細(xì)胞。

7.一種單細(xì)胞激光彈射基片在循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTC）分析中的應(yīng)用，所述應(yīng)用不涉及疾病的診斷和治療，其特征在于：包括以下步驟：

1）CTC細(xì)胞懸液滴涂于權(quán)利要求1所述的單細(xì)胞激光彈射基片表面；

2）利用拉曼檢測或熒光成像對(duì)CTC細(xì)胞進(jìn)行觀察識(shí)別，并采用激光彈射技術(shù)分離獲取單個(gè)CTC細(xì)胞；

3）對(duì)分離后的單個(gè)CTC細(xì)胞進(jìn)行單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組或基因組測序，分析其表達(dá)譜或基因突變位點(diǎn)。