[發明專利]提取木豆素、木豆素A、木豆素C、木豆內酯A的工藝

在審

• 申請號: 201810037368.3
• 申請日: 2018-01-16
• 公開（公告）號: CN107879906A
• 公開（公告）日: 2018-04-06
• 發明（設計）人: 任孝德;王艷艷;劉長河;李華妮;葛文靜;李開言;王曉麗;劉方洲;胡雨菲;郭榮華
• 申請（專利權）人: 河南省中醫藥研究院
• 主分類號: C07C41/34
• 分類號: C07C41/34;C07C43/23;C07C51/42;C07C65/28;C07D311/16
• 代理公司: 鄭州匯科專利代理事務所(特殊普通合伙)41147
• 代理人: 李偉

1.提取木豆素、木豆素A、木豆素C、木豆內酯A的工藝，其特征在于：所述的提取工藝包括如下步驟：

步驟1：選材,選取一定量的干燥木豆葉；

步驟2：粗粉,將步驟1選取的木豆葉放入粉碎機中進行粉碎，得到粗粉顆粒，其中粗粉顆粒的粒徑為20-60目；

步驟3：熱乙醇超聲提取，將步驟2得到的粗粉顆粒放入容器內，加入5倍量的70%熱乙醇，超聲處理10分鐘，過濾，藥渣再次加入5倍量的70%熱乙醇超聲處理一次，將兩次得到的超聲提取液進行混合，并冷卻至室溫，得到木豆葉提取液，其中70%熱乙醇的溫度為50℃；

步驟4：處理DA201，分別取體積為DM21容積2倍的4%氫氧化鈉溶液、4%鹽酸溶液、乙醇依次交替處理；

步驟5：大孔樹脂吸附，將步驟3得到的超聲提取液緩慢加至已經處理好的DA201大孔樹脂柱上，流速為5-10ml/min，并棄去流出液；

步驟6：洗脫，取木豆葉質量1倍的70%乙醇洗脫DA201大孔樹脂柱，并棄去70%乙醇洗脫液，繼續用95%乙醇洗脫DA201大孔樹脂柱，其中95%乙醇的質量與木豆葉的質量比為5：1；

步驟7：回收乙醇，將步驟6中的洗脫液放入到減壓罐內，控制溫度為60℃，壓力為0.04-0.1MPa，加熱回收乙醇直至沒有醇味；

步驟8：處理NKA-9，取體積為NKA-9容積2倍的4%氫氧化鈉溶液在10-30ml/min流速通過，去離子水洗至流出液為中性，再取體積為NKA-9容積2倍的4%鹽酸溶液在10-30ml/min流速通過，去離子水洗至流出液為中性，再取體積為NKA-9容積1倍的95%乙醇洗脫，最后取體積為NKA-9容積3倍的去離子水洗；

步驟9：水洗脫，將步驟7得到的液體以流速10-20ml/min流入NKA-9大孔吸附樹脂柱，然后水洗脫至流出液為無色，棄去水溶液；

步驟10：60%乙醇洗脫，將步驟9的NKA-9大孔吸附樹脂柱繼續加入木豆葉質量2倍的60%乙醇洗脫，并收集洗脫液；

步驟11：濃縮，將步驟10得到的60%乙醇洗脫液放至薄膜濃縮裝置中在溫度為60℃、壓力為0.04-0.1mpa的環境中進行濃縮至無醇味，并繼續濃縮成干燥的浸膏；

步驟12：拌樣，將步驟11得到的浸膏中加入2倍量柱層析硅膠，混勻，并低溫干燥；

步驟13：裝柱，取步驟12所得的樣品的10倍量柱層析硅膠，裝入層析柱，上層裝入步驟12樣品，最上層再裝入空白硅膠，連接壓力泵及管路；

步驟14：洗脫，用石油醚-環己烷（40:1） 洗脫，每30ml收集一份，收集第20～30份時進行合并，低溫、減壓濃縮得木豆素內酯A；

步驟15：繼續用石油醚-環己烷（10:1）洗脫，每30ml收集一份，收集第20～30份時進行合并，低溫、減壓濃縮得木豆素A；收集第31～40份時進行合并，低溫減壓濃縮得木豆素C；

步驟16：繼續用石油醚-環己烷（5:1）洗脫，每30ml收集一份，收集第20～30份時進行合并，低溫、減壓濃縮得木豆素。

2.如權利要求1所述的提取木豆素、木豆素A、木豆素C、木豆內酯A的工藝，其特征在于：所述的DA201大孔樹脂柱為直徑8cm，高100cm。

3.如權利要求1所述的提取木豆素、木豆素A、木豆素C、木豆內酯A的工藝，其特征在于：所述的NKA-9大孔樹脂柱為直徑8cm，高100cm。