[發明專利]一種利用厚樸葉片粗酶液降解壬基酚的方法

在審

• 申請號: 201810037097.1
• 申請日: 2018-01-15
• 公開（公告）號: CN108164005A
• 公開（公告）日: 2018-06-15
• 發明（設計）人: 肖強;周秀梅;王雨雪;蒲圩;唐密
• 申請（專利權）人: 湖北民族學院
• 主分類號: C02F3/34
• 分類號: C02F3/34;C02F101/34
• 代理公司: 北京國坤專利代理事務所(普通合伙) 11491
• 代理人: 趙紅霞

1.一種利用厚樸葉片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述利用厚樸葉片粗酶液降解壬基酚的方法包括：

步驟一，稱取成熟厚樸樹葉，按照1：5料液比加入含2％聚乙烯吡咯烷酮和2mmol/L乙二胺四乙酸的檸檬酸-磷酸緩沖液，4℃勻漿，4層紗布過濾，濾液在4℃下，12000g離心20min，棄沉淀，保留上清液；

步驟二，在上清液中加入硫酸銨，達到20％飽和度，沉淀過夜，離心，棄去沉淀，取上清液，繼續加入硫酸銨，取60％～90％飽和度部分的沉淀，以適量純水溶解后即為粗酶液；

步驟三，移取緩沖溶液，控制反應體系溫度為10～50℃，pH值為3～11，加入適量粗酶液，使反應體系中NP濃度為10～20μmol/L，加入摩爾濃度為NP10～100倍的H₂O₂啟動反應，反應時間為180min；于反應開始1min、3min、5min、15min、45min、90min、120min、180min從上述反應體系中取樣1ml，加入2mL甲醇終止反應，實現厚樸葉片粗酶液對NP的降解；在終止反應液里加入適量明礬，搖勻，過夜沉淀后5000g離心10min；離心后的上清液過0.22μm濾膜后，采用液相色譜質譜聯用儀檢測，流動相為80％甲醇/水，質譜檢測準分子離子峰對應的相對分子質量為219.18。

2.如權利要求1所述的利用厚樸葉片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述步驟一厚樸葉提取液中為有聚乙烯吡咯烷酮、乙二胺四乙酸的檸檬酸—磷酸緩沖液。

3.如權利要求1所述的利用厚樸葉片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述步驟一緩沖溶液為醋酸—醋酸鈉緩沖溶液、硼砂緩沖溶液、檸檬酸—磷酸緩沖液中的任一種。

4.如權利要求1所述的利用厚樸葉片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述pH值為7。

5.如權利要求1所述的利用厚樸葉片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述NP初始濃度為10～20μmol/L。

6.如權利要求1所述的利用厚樸葉片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述溫度為室溫。

7.如權利要求1所述的利用厚樸葉片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述反應時間為180min。

8.如權利要求1所述的利用厚樸葉片粗酶液降解壬基酚的方法，其特征在于，所述酶加入量為60U/ml。