[發明專利]一種EV71病毒IgA抗體檢測試紙條

有效

• 申請號: 201810036090.8
• 申請日: 2018-01-15
• 公開（公告）號: CN108267577B
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 王長兵;朱冰;李英華;鄺璐;韓寧;陳翊;許甜甜;林正方
• 申請（專利權）人: 廣州市婦女兒童醫療中心
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533;G01N33/569
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星

本發明公開了一種EV71病毒IgA抗體檢測試紙條。它包括樣品墊、標記墊、硝酸纖維素膜、吸水紙和背板，其特征在于，所述的硝酸纖維素膜上設有含有抗原的檢測線和人IgA抗體的對照線，標記墊中含有抗人IgA抗體量子微球標記物；所述的抗原包括EV71病毒VP2蛋白抗原多肽，其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.1。本發明比較適合幼兒園篩選手足口病毒，不需要專業的醫務人員就可以篩查疑是感染幼兒，可以避免EV71病毒在幼兒園傳播擴散。本發明也適合家庭診斷，家長可以提前了解子女的病情，并及早送至醫院進行診療，縮短病程。

技術領域

本發明屬于醫學檢驗領域，具體地公開了一種EV71病毒IgA抗體檢測試紙條。

背景技術

EV71病毒屬于腸道病毒一員，一般感染6歲以下兒童，常見癥狀主要包括發繞、食欲不振、咽喉痛、口腔潰瘍、手部腳部水泡等，嚴重的可導致無菌性腦膜炎、腦炎、脊髓灰質炎樣麻痹及神經源性肺水腫等嚴重的中樞神經系統并發癥，并引起死亡。EV71病毒發病有一定的季節性，一般4-7月為病毒感染的高發期，其它月份有零星感染病例，是兒童群體中死亡人數最多的病毒。目前EV71病毒沒有特殊的藥物可以治療，臨床上基本是對癥治療，嚴重的病患一般采用丙球蛋白和激素保守治療方案。EV71的預防主要方式還是通過早期診斷及早隔離病患防治病毒傳播，因此有必要開發一種適合幼兒園早期診斷EV71病毒的檢測方法。

EV71病毒早期診斷方法包括病毒分離培養、RT-PCR熒光檢測方法、血清IgM抗體檢測方法等。病毒分離培養方法是確證EV71病毒感染的金標準方法，但是由于實驗條件和診斷時間等缺陷，目前該方法主要應用于實驗室，無法在臨床上使用該技術。RT-PCR熒光檢測技術是EV71病毒檢測臨床上推廣最好的檢測方法，優點是靈敏度高。但是由于RT-PCR熒光檢測技術需要嚴格認證的實驗室條件、昂貴的熒光檢測儀、專業培訓的技術員，因此無法在社區診所、幼兒園等基層單位推廣。血清IgM抗體檢測方法主要是檢測患者血清中IgM抗體判斷EV71病毒感染情況，主要的技術方式包括酶聯免疫技術和膠體金快速層析技術，存在一定的假陽性和假陰性。

發明內容

本發明的目的是提供一種靈敏度高、準確性高，能高效快速檢測EV71病毒的EV71病毒IgA抗體檢測試紙條及其檢測方法。

本發明主要是利用量子點標記物信號放大的優勢，提高免疫診斷的靈敏度。量子點具有靈敏度高、穩定性好、熒光壽命長等優勢，是新一代熒光標記物最佳選擇。量子點技術在2003年被Science雜志評為年度十大科學突破之一。本發明的檢測對象是人唾液中IgA抗體，通過檢測患者唾液中的EV71病毒IgA抗體判斷EV71病毒感染的情況。

本發明的EV71病毒IgA抗體檢測試紙條，包括樣品墊、標記墊、硝酸纖維素膜、吸水紙和背板，其特征在于，所述的硝酸纖維素膜上設有包被抗原的檢測線和人IgA抗體的對照線，標記墊中含有抗人IgA抗體量子微球標記物；

所述的抗原包括EV71病毒VP2蛋白抗原多肽，其氨基酸序列如序列表SEQ IDNO.1。

優選，所述的抗原的包被濃度為0.2-2mg/ml。

優選，所述的人IgA抗體包被濃度為0.5-3mg/ml。

優選，所述的抗原是EV71病毒VP2蛋白抗原多肽與BSA蛋白的交聯產物。

進一步優選，所述的抗原是采用馬來酰亞胺基苯甲酸琥珀酰亞胺酯作為交聯劑，將EV71病毒VP2蛋白抗原多肽與BSA蛋白交聯后的交聯產物。

再進一步優選，所述的EV71病毒VP2蛋白抗原多肽與BSA蛋白的交聯產物是通過以下方法制備的：