[發(fā)明專利]基于SPE柱同時(shí)富集檢測飲用水中喹諾酮類抗生素的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810035741.1
• 申請日: 2018-01-15
• 公開（公告）號: CN108414654B
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 崔長征;張?zhí)礻?/a>;金郁;韓琪;胡亞茹;曹贊;雷丹丹;姚詩杰;奚楨浩;王漫莉;任靜;徐曉慶
• 申請（專利權(quán)）人: 華東理工大學(xué)
• 主分類號: G01N30/08
• 分類號: G01N30/08;G01N30/86
• 代理公司: 上海科盛知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31225
• 代理人: 劉燕武

本發(fā)明涉及一種基于SPE柱同時(shí)富集檢測飲用水中喹諾酮類抗生素的方法，首先利用反相/離子交換混合模式色譜填料的固相萃取柱對預(yù)處理后的水樣濃縮富集，然后利用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC?MS/MS)進(jìn)行分析檢測，最后，根據(jù)樣品的分析色譜圖以及每種抗生素的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線確定水樣中喹諾酮類抗生素的濃度。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明采用SPE?HPLC?MS/MS實(shí)現(xiàn)了飲用水中痕(微)量典型喹諾酮類抗生素的同時(shí)富集檢測，檢測結(jié)果精度可靠，檢出限低，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小等，且本方法可有效的應(yīng)用于糞便、土壤、地表水和飲用水中痕(微)量喹諾酮的檢測和定量分析。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及水環(huán)境中痕(微)量有機(jī)污染物檢測分析技術(shù)，尤其是涉及一種基于反相/離子交換混合模式色譜填料的新型SPE柱同時(shí)富集檢測飲用水中喹諾酮類抗生素的方法。

背景技術(shù)

喹諾酮類(Quinolones,QNs)抗生素作為一種人工合成的具有廣譜抗性、抗菌力強(qiáng)、穿透力強(qiáng)、高效低毒、半衰期長的的一類抗生素，被廣泛應(yīng)用于人類、畜牧養(yǎng)殖等存在的細(xì)菌性疾病的預(yù)防和治療。但是由于QNs抗生素在生物體內(nèi)僅有很少一部分被生物吸收降解，絕大部分以母體形式排除體外，通過地表徑流在自然界中遷移進(jìn)入飲用水環(huán)境中直接影響人類健康，同時(shí)環(huán)境中喹諾酮的積累能夠誘發(fā)環(huán)境細(xì)菌的耐藥性造成部分藥物“失效”。因此，飲用水源地中QNs抗生素殘留情況越來越多的受到人類的關(guān)注。

目前QNs抗生素在地表水、水廠中普遍被檢出，其中NOR、OFL、ENR、CIP、LOM等在水環(huán)境中檢出頻率高，檢出濃度大，部分水廠中也有部分的殘留，甚至部分獸藥類喹諾酮在人類尿液中檢出，如NOR、OFL、CIP、ENR等(Wang H,Wang N,Wang B.,et al.Antibioticsdetected in urines and adipogenesis in school children[J].EnvironmentInternational,2016,89-90:204-211)。因此，建立飲用水源水中QNs抗生素精確的檢測分析方法是對其開展有效控制的基礎(chǔ)和前提。

雖然目前國內(nèi)外在QNs抗生素檢測分析方法上已開展諸多研究，但多數(shù)檢測方法只能針對動物源性QNs抗生素分析，檢出限相對較高。如中國專利號CN101315351A公開了一種同時(shí)檢測19種QNs藥物的測定方法。所述方法采用乙腈對動物組織樣品進(jìn)行提取，用諾氟沙星-D₅作為樣品內(nèi)標(biāo)，處理后的樣品用HPLC-ESI-MS/MS分析樣品濃度。但該方法樣品提取后不經(jīng)富集直接進(jìn)樣測定，適用濃度較高，不適用于飲用水源地痕量QNs抗生素分析。

中國專利號CN104730168A公開了一種水環(huán)境中殘留的四環(huán)素類、氟喹諾酮類和磺胺類抗生素同步檢測的方法。所述方法涉及一種水環(huán)境中殘留抗生素富集檢測技術(shù)，具體涉及一種采用HLB固相萃取和高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜對水體殘留四環(huán)素類，氟喹諾酮類和磺胺類抗生素等21種抗生素同時(shí)檢測的方法。該方法雖然可以檢測環(huán)境水體中痕量抗生素的殘留情況，但是該方法兼顧抗生素種類較多，不同種類抗生素之間存在干擾，對QNs抗生素不夠靈敏。

中國專利號CN101696964A公開了一種氟喹諾酮類抗生素的固相萃取與HPLC-熒光檢測方法。所述方法涉及氟喹諾酮類抗生素檢測技術(shù)，具體涉及一種固相萃取與HPLC-熒光檢測對水環(huán)境樣品中OFL、CIP、NOR和ENR等4種典型QNs抗生素的檢測方法。該方法采用C18鍵合硅膠固相萃取柱富集水樣中的抗生素，用濃氨體積比為6％的濃氨甲醇溶液洗脫三次，氮吹定容至1mL，利用HPLC-熒光檢測分析樣品中喹諾酮的濃度。該方法較上一種方法操作簡單，成本低，對喹諾酮類抗生素針對性強(qiáng)，但就目前水環(huán)境中可能殘留的喹諾酮類物質(zhì)而言，僅針對4種喹諾酮類抗生素，檢測種類較少。

目前飲用水環(huán)境中殘留的抗生素情況受到廣泛的關(guān)注，但是針對QNs抗生素檢測方法檢出限較高，研究種類較少，回收率相對較低，本發(fā)明方法恰好填補(bǔ)了這一空白，針對水環(huán)境中QNs抗生素進(jìn)行分析檢測，可以實(shí)現(xiàn)一次性定量分析飲用水中痕量喹諾酮的同時(shí)檢測，極大提高了檢測效率。

發(fā)明內(nèi)容