[發明專利]一種細胞塊制備方法及容器

在審

• 申請號: 201810033741.8
• 申請日: 2018-01-15
• 公開（公告）號: CN108303295A
• 公開（公告）日: 2018-07-20
• 發明（設計）人: 李輝
• 申請（專利權）人: 北京賽普九洲科技發展有限公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/36
• 代理公司: 北京紐樂康知識產權代理事務所(普通合伙) 11210
• 代理人: 史靜

本發明公開了一種細胞塊制備方法及容器，方法包括以下步驟：將瓊脂膠體置入導熱容器內；對裝有瓊脂膠體的導熱容器加熱，直至瓊脂膠體變為熔融狀態；將導熱容器的上蓋取下，將離心聚集后的細胞團加入至熔融狀態下的瓊脂膠體中后將上蓋蓋好；將導熱容器置于離心機中離心，待細胞團在熔融狀態下的瓊脂膠體中聚集后，取出導熱容器，并使其自然冷卻；待導熱容器內的瓊脂膠體凝固后，將導熱容器的上蓋、下蓋取下，將瓊脂膠體捅出，并將瓊脂膠體放置在包埋盒中用石蠟包埋。使用方法簡單，處理快速，節約人力及時間；過程簡便，人員操作熟練程度，環境因素等對結果影響較小，易于實現標準化操作；制得細胞塊聚集效果好，干擾小，便于診斷。

技術領域

本發明涉及細胞塊制備技術領域，具體來說，涉及一種細胞塊制備方法及容器。

背景技術

細胞塊（cellblock):確切地說是組織學制片方法在細胞學標本中的應用，是將分散的細小組織、細胞團、細胞聚集成團，制得細胞塊之后進行石蠟包埋切片。首先，該技術可以保留更多的組織學結構，其次，細胞塊切片有助于免疫組化、基因檢測等輔助檢查在細胞學中的應用。目前正在病理科學界廣泛開展及應用。

目前對于細胞塊的制備，一般使用試劑固定等預處理后，使用膠體、瓊脂包裹或脫脂棉包裹，之后使用石蠟制片。

因涉及的操作流程較多，在石蠟包埋前，預處理過程一般需要人工反復轉移標本、靜置、過濾等操作過程，較為復雜，耗時長；因此在實際的應用過程中，容易造成標本的遺失，且會占用技術人員的大量時間。

依照對細胞塊制備方式一般為以下兩個步驟：

1、標本的聚集：

標本中的細胞、組織，顆粒小，不易聚集。目前一般采用三種方式聚集細胞，過濾、離心、靜置。

過濾：過濾后，在濾網上會有標本的殘留，造成標本遺失，有缺陷；

離心：標本聚集在離心管底部，時間短，但須調整離心速率防止損壞細胞；

靜置：通過自然沉降的方式，將標本聚集在試管底部，時間長。

2、標本的包裹：

細胞團或細小組織塊，顆粒小，在滴加試劑、吸取試劑等過程中因液體流動分散，影響后期切片的制備，因此需要將標本進行包裹束縛，確保其在整個制片過程中，不會分散，應先制片效果。

目前一般采用蛋清、瓊脂和脫脂棉纖維包裹三種方式。

蛋清：通過蛋清的粘附作用包裹細胞團，然后通過加入甲醛使得蛋清變性，凝固包裹標本；

瓊脂：通過將瓊脂溶融后，呈現液體性質，包裹細胞團，降低溫度后，瓊脂凝固成固體，包裹標本；

脫脂棉纖維：將脫脂后的棉纖維，直接包裹。

目前細胞塊制備，以上兩個過程，多數需要人工操作，先聚集然后加入試劑等，嚴格按照操作流程進行，因采用的技術方式不同，流程不同。 但均需大量的人員操作，流程煩雜，耗時長。

使用瓊脂法制備時，一般的制備流程簡述如下：

1）將標本離心或將標本置于試管中，靜置24小時。棄去上清液；

2）加入甲醛試劑固定，固定2~12小時或離心，棄去上清液；

3）使用濾紙吸干剩余液體，將細胞團聚集；

4）將細胞團放置在容器中，使用熔融的瓊脂覆蓋細胞團或使用棉纖維包裹細胞團；

5）冷卻后，將包裹的細胞團放置在包埋盒中，進行石蠟包埋。