[發明專利]一種鴨病毒性肝炎病毒及其應用

在審

• 申請號: 201810032661.0
• 申請日: 2018-01-12
• 公開（公告）號: CN108070571A
• 公開（公告）日: 2018-05-25
• 發明（設計）人: 徐保娟;孫厚民;王麗萍;孫健;李彬;劉平;曹志;宮曉;郭偉偉;韓乃君
• 申請（專利權）人: 青島易邦生物工程有限公司
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/125;A61P31/14;C12R1/93
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

本發明提供一種雞胚適應性鴨病毒性肝炎病毒，其保藏編號為CCTCC No.V201761。本發明的雞胚適應性鴨病毒性肝炎病毒用于制備疫苗。本發明從優勢流行毒株中篩選出免疫原性良好的鴨病毒性肝炎病毒，經在SPF雞胚傳代，傳至58代后獲得的一株穩定的，免疫原性好的雞胚適應疫苗制備毒株，接種雞胚，收獲死亡胚胚體和胚液，經研磨、凍融后收取病毒液，甲醛溶液滅活后，加油佐劑混合乳化制成疫苗。此疫苗能預防由新型鴨肝炎病毒引起的雛鴨病毒性肝炎，具有高效、安全性好、保護率高等優點。

技術領域

本發明屬于疫苗制備技術領域，具體涉及一種鴨病毒性肝炎病毒及其應用。

背景技術

鴨病毒性肝炎(duck viral hepatitis,DVH)是由鴨病毒性肝炎病毒(duckhepatitis virus,DHV)引起雛鴨的一種以肝臟腫脹和出血為主要病理變化的急性、高度致死性、接觸性傳染病。臨床表現痙攣、抽搐和角弓反張等神經癥狀，以肝臟腫脹和出血為特征性病變。1～3周齡的雛鴨易感，發病嚴重，傳播迅速，雛鴨通常在出現癥狀后的1小時內死亡，10日齡雛鴨感染后死亡率90～95％，已經成為嚴重危害養鴨業的主要疾病之一。

鴨肝炎病毒(DHV)血清型DHV有4個獨立的血清型，1型、2型、3型和新型(未定型)。范書才等(范書才,李虹,袁率珍等.新型鴨肝炎病毒的分離鑒定.中國預防獸醫學報,2009,10)通過試驗證明目前在我國同時存在1型和新型DHV流行。血清中和試驗表明，1型和新型之間缺乏交叉保護作用。在4個血清型的DHV中，1型與新型DHV流行最廣泛，毒力最強，對3周齡內的雛鴨致死率可在80％以上；2型DHV僅在英國，3型僅在美國有報道；二者均呈散發性流行，致死率低(約20％)。

由于市場SPF鴨胚來源比較困難，所以目前現有的鴨肝炎新型滅活疫苗均采用鴨胚制造，鴨胚很難保證鴨胚的鴨病毒性肝炎中和抗體陰性及純凈性，因此本發明開展了新型鴨病毒性肝炎在SPF雞胚傳代的試驗。

發明內容

本發明的目的是制備新型雞胚適應毒的鴨病毒性肝炎抗原，制成新型油乳劑滅活疫苗，用此疫苗免疫動物，可預防新型鴨肝炎病毒引起的雛鴨病毒性肝炎，此疫苗具有效價高、保護率高、安全性好等優點。

本發明首先提供一種雞胚適應性鴨病毒性肝炎病毒，是將野生的鴨病毒性肝炎病毒在雞胚上進行傳代后獲得的能穩定在雞胚上增殖的病毒；

所述的雞胚適應性鴨病毒性肝炎病毒，其一種為鴨病毒性肝炎病毒YBHXN株，已于2017年11月23日送保藏在武漢大學的中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCCNo.V201761。

本發明的雞胚適應性鴨病毒性肝炎病毒用于制備疫苗；

本發明再一個方面提供一種疫苗，其中使用的抗原為滅活的病毒性肝炎病毒YBHXN株；

所述的滅活是采用甲醛溶液進行滅活；

本發明所提供的疫苗，包含疫苗佐劑，其中佐劑為獸用白油、硬脂酸鋁和司本80；

上述佐劑中獸用白油、硬脂酸鋁和司本80的質量份數比:47：1：3；

本發明從優勢流行毒株中篩選出免疫原性良好的鴨病毒性肝炎病毒，經在SPF雞胚傳代，傳至58代后獲得的一株穩定的，免疫原性好的雞胚適應疫苗制備毒株，接種雞胚，收獲死亡胚胚體和胚液，經研磨、凍融后收取病毒液，甲醛溶液滅活后，加油佐劑混合乳化制成疫苗。此疫苗能預防由新型鴨肝炎病毒引起的雛鴨病毒性肝炎，具有高效、安全性好、保護率高等優點。

附圖說明

圖1：N-DHV引物擴增條帶圖。

具體實施方式