[發明專利]腫瘤免疫細胞亞群精準分型的質譜流式檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201810030643.9
• 申請日: 2018-01-12
• 公開（公告）號: CN108226016A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 石宏宇
• 申請（專利權）人: 浙江普羅亭健康科技有限公司
• 主分類號: G01N15/14
• 分類號: G01N15/14;G01N27/62
• 代理公司: 杭州華知專利事務所(普通合伙) 33235
• 代理人: 趙梅

本發明公開了一種腫瘤免疫細胞亞群精準分型的質譜流式檢測試劑盒，由42種帶金屬標簽的抗體組成。本發明研發出42個通道42種抗體的試劑盒，利用質譜流式檢測，可一次同時檢測42種抗體，實現對腫瘤免疫細胞亞群精準分型。本發明試劑盒經測試，可以實現腫瘤疾病的所有免疫細胞亞群系統的、全面的、動態的、精準的分型，而且無需各通道單染對照，不需要計算補償，節約樣品。

技術領域

本發明涉及細胞生物學技術領域，具體涉及一種腫瘤免疫細胞亞群精準分型的質譜流式檢測試劑盒。

背景技術

免疫系統在疾病的發生、發展、預后過程中起著重要作用。但是，目前的研究手段大多集中在研究幾種免疫細胞亞群在疾病中的功能及分子機制。同時，由于技術手段的缺陷，導致以往的研究對各類免疫細胞亞群的定義不夠準確，研究結果過于片面。比如傳統流式細胞技術，熒光信號的交疊限制了熒光通道的數量增長，通道數目少，而且通道的發射光譜嚴重重疊，需要設置空白組、陰性對照組及各通道的單染組，進行復雜的補償計算，樣品消耗量巨大。

質譜流式細胞技術(Mass Cytometry,CyTOF)是近年來剛發展起來的單細胞分子分型技術。其使用金屬元素作為抗體分子的標簽并利用ICP質譜檢測系統對單細胞表面及內部多種蛋白分子同時進行檢測。與傳統流式細胞技術相比，具有檢測通道多、通道間無干擾、信號精度高及通量大等特點。

雖然美國Fluidigm公司的質譜流式細胞儀功能強大，并且擁有600多種金屬預標記的抗體，但是，目前針對腫瘤患者外周血的免疫細胞亞群分析的研究，沒有現成的試劑盒可以直接使用，而且通道數目也只有35個。預標記抗體購買渠道單一，成本昂貴且耗時長。國內也沒有類似試劑盒產品的研發和生產。

因此，在對腫瘤疾病的免疫系統研究中，缺乏對所有免疫細胞亞群系統的、全面的、動態的、精準的描述。

發明內容

本發明目的是提供一種腫瘤免疫細胞亞群精準分型的質譜流式檢測試劑盒，主要針對腫瘤患者外周血的免疫細胞亞群進行質譜流式檢測，達到精準分型的目的，以解決現有技術的不足。

本發明采用以下技術方案：

一種腫瘤免疫細胞亞群精準分型的質譜流式檢測試劑盒，由42種帶金屬標簽的抗體組成，具體如下表所示：

其中，編號3、24、25、31、32、34、36為胞內抗體，其它為胞外抗體。

本發明的有益效果：

本發明研發出42個通道42種抗體的試劑盒，利用質譜流式檢測，可一次同時檢測42種抗體，實現對腫瘤免疫細胞亞群精準分型。本發明試劑盒經測試，可以實現腫瘤疾病的所有免疫細胞亞群系統的、全面的、動態的、精準的分型，而且無需各通道單染對照，不需要計算補償，節約樣品。

附圖說明

圖1至圖4為實施例1中42種抗體染色效果圖。

具體實施方式

下面結合實施例和附圖對本發明做更進一步地解釋。下列實施例僅用于說明本發明，但并不用來限定本發明的實施范圍。

一種腫瘤免疫細胞亞群精準分型的質譜流式檢測試劑盒，由42種帶金屬標簽的抗體組成，具體如表1所示：

表1

試劑盒中的42種抗體使用42個通道，編號3、24、25、31、32、34、36為胞內抗體，其它為胞外抗體，可以鑒定所有的T細胞亞群，包括T、central memory T、effector T、effector memory CD4+T及CD8+T，和B細胞亞群等。