[發明專利]一種節糧型青脛隱性白羽肉雞新品系的選育方法

有效

• 申請號: 201810029015.9
• 申請日: 2018-01-12
• 公開（公告）號: CN108220408B
• 公開（公告）日: 2021-07-06
• 發明（設計）人: 李春苗;趙振華;黎壽豐;黃華云;王錢保;黃正洋;梁忠;薛龍崗
• 申請（專利權）人: 江蘇省家禽科學研究所;揚州翔龍禽業發展有限公司
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686;C12Q1/6888;A01K67/02
• 代理公司: 揚州蘇中專利事務所(普通合伙) 32222
• 代理人: 李楠

1.一種節糧型青脛隱性白羽肉雞品系的選育方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）利用邵伯雞S3系作為父本，隱性白羽雞作為母本進行雜交，生產出F1代；邵伯雞S3系為黃羽、青矮脛，隱性白羽雞為隱性白羽、正常黃脛；

（2）在F1代中選擇白羽、青矮脛的母雞作為母本，選擇白羽、正常青脛的公雞作為父本；

（3）利用AS-PCR方法測定留做公母雞親本F1代的羽色基因型，選留基因型為cc型的純合隱性白羽、青矮脛母雞和純合隱性白羽、正常青脛的公雞，淘汰基因型為CC或Cc的有色羽或白羽公母雞；

（4）將F1代中鑒定出的純合隱性白羽、青矮脛的母雞和純合隱性白羽、正常青脛的公雞進行自交，產生F2代；

（5）利用普通PCR方法測定F2代中青脛公母雞的矮小基因的基因型，選留純合矮小基因dwdw基因型個體，淘汰DWDW/DWdw基因型個體，得到節糧型青脛隱性白羽肉雞品系；

所述步驟（1）中隱性白羽雞為TYR基因第4內含子插入7.7kb逆轉錄病毒后產生的隱性白羽雞；

所述步驟（3）中利用AS-PCR測定F1代留種的青脛白羽雞羽色基因型的方法，包括以下步驟：以待測雞基因組DNA為模板，以引物對P1和P2的混合引物擴增TYR基因和插入逆轉錄病毒基因，對擴增得到的片段進行瓊脂糖凝膠電泳，根據瓊脂糖凝膠電泳結果鑒定雞羽色基因型；

所述的引物對P1為：

上游引物，P1-F：5’-tagcactggaaatagtaaacccagt-3’；

下游引物，P1-R：5’-agatctgatgggcttgcttgaggta-3’；

所述引物對P2為：

上游引物， P2-F：5’-tagcactggaaatagtaaacccagt-3’；

下游引物，P2-R：5’-tgctgaaaggactgcttttggggct-3’；

所述的鑒定雞隱性白羽基因型的方法為：CC基因型僅為284bp條帶，表現有色羽；Cc基因型為284bp和771bp條帶，表現為有色羽或白羽；cc基因型僅為771條帶，表現為隱性白羽；

所述的鑒定的雞矮小基因的方法為：DWDW基因型和DW/dw基因型均為483bp條帶，表現為正常脛，dwdw基因型為沒有任何條帶，表現為矮小脛；

所述的AS-PCR反應體系為：10×PCR Buffer 2.5 μL，2 mmol/L dNTP 2.0 μL，5 U/μLTaq DNA聚合酶0.5 μL，P1或P2上游引物為1.0μL，P1和P2下游引物均為0.5μL， DNA模板1.0μL，ddH₂O 17.0 μL。

2.根據權利要求1所述的節糧型青脛隱性白羽肉雞品系的選育方法，其特征在于：所述步驟（5）中利用普通PCR方法測定F2代留種的青矮脛隱性白羽雞矮小基因的基因型方法，包括以下步驟：以待測雞基因組DNA為模板，以引物對P3的混合引物擴增dw基因，對擴增得到的片段進行瓊脂糖凝膠電泳，根據瓊脂糖凝膠電泳結果鑒定雞dw基因的基因型；

所述引物對P3為：

上游引物P3-F：5’-cagcttgggcttgtgtgctgaaacca-3’

下游引物P3-R：5’-tcataattaaactacatcatgtagt-3’。

3.根據權利要求2所述的節糧型青脛隱性白羽肉雞品系的選育方法，其特征在于：所述的普通PCR反應體系為：10×PCR Buffer 2.5 μL， 2 mmol/L dNTP 2.0 μL，5 U/μL Taq DNA聚合酶0.5 μL，所述引物P3的上、下游引物各1.0 μL，DNA模板1.0 μL，ddH2O 17.0 μL。

4.根據權利要求1或2所述的節糧型青脛隱性白羽肉雞品系的選育方法，其特征在于：所述AS-PCR或普通PCR擴增的反應條件相同，具體為：95℃預變性5min，95℃變性30s，退火30s，72℃延伸30s，35個循環，72℃延伸10分鐘，4℃保存；P1/P2和P3的退火溫度分別為65℃和59℃。

5.根據權利要求1或2所述的節糧型青脛隱性白羽肉雞品系的選育方法，其特征在于：所述AS-PCR或普通PCR擴增的瓊脂糖凝膠電泳的濃度為1.5%，所述的瓊脂糖凝膠電泳的電壓為120V，電泳時間為30min。