[發明專利]一種新型秀麗隱桿線蟲同步化的方法有效
| 申請號： | 201810028573.3 | 申請日： | 2018-01-12 |
| 公開（公告）號： | CN110150230B | 公開（公告）日： | 2021-08-27 |
| 發明（設計）人： | 屈長青;張秋妍;姬云濤;孫慧慧;王永美 | 申請（專利權）人： | 阜陽師范學院 |
| 主分類號： | A01K67/033 | 分類號： | A01K67/033;B07B1/04 |
| 代理公司： | 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 宋平 |
| 地址： | 236037 *** | 國省代碼： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 新型 秀麗 線蟲 同步 方法 | ||
1.一種秀麗隱桿線蟲同步化的方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)選取900-1100目尼龍篩網，將其制作成直徑1cm、高度1cm的圓環型過濾網；
2)配制固體培養基，110-130℃高壓滅菌15-25min后制備平板，平板厚度0.4-0.6cm，在培養基凝固之前，將圓環型過濾網置于平板中央，過濾網高度超過培養基表面0.4-0.6cm，然后冷卻凝固；
3)將已培養3-4天的處于不同時期的秀麗隱桿線蟲用0.15-0.25mL緩沖液沖洗到離心管中，然后將離心管放置到離心機中離心，棄去上清液，靜置4-6min后，將其轉移至培養基的圓環型 過濾網中；
4)NaCl溶液作為秀麗隱桿線蟲的驅避劑，將其滴加至圓環型過濾網中使線蟲趨避擴散，在鹽水的驅避作用下，秀麗隱桿線蟲逃散，L1期的秀麗隱桿線蟲穿透900-1100目尼龍篩網，活動于圓環型過濾網外側的培養基上；
5)8-12min后，用0.15-0.25mL緩沖液沖洗圓環型過濾網外側的培養基上的L1期的秀麗隱桿線蟲至離心管中，然后將離心管放置到離心機中離心，棄去上清液，重復沖洗3次，得L1期秀麗隱桿線蟲；
6)將L1期秀麗隱桿線蟲接至含大腸桿菌的培養基中，18-22℃培養45-50h，得L4期線蟲；
NaCl溶液的濃度為180-220mmol/L。
2.如權利要求1所述的一種秀麗隱桿線蟲同步化的方法，其特征在于：所述固體培養基為NGM固體培養基。
3.如權利要求1所述的一種秀麗隱桿線蟲同步化的方法，其特征在于：所述步驟3和步驟5中的緩沖液均為M9緩沖液，離心管均為1.5mL規格的離心管，離心過程的離心轉速均為1500-2500rpm，離心時間均為0.5-1.5min。
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