[發明專利]一種誘導產生玉米母本單倍體的方法有效
| 申請號： | 201810023202.6 | 申請日： | 2018-01-10 |
| 公開（公告）號： | CN108192912B | 公開（公告）日： | 2019-05-07 |
| 發明（設計）人： | 陳紹江;劉晨旭;鐘裕;陳琛 | 申請（專利權）人： | 中國農業大學 |
| 主分類號： | C12N15/82 | 分類號： | C12N15/82;C12N9/22;A01H1/06;A01H1/02;A01H6/46 |
| 代理公司： | 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245 | 代理人： | 關暢;白艷 |
| 地址： | 100094 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 玉米母本 單倍體 誘導 父本 母本 單倍體誘導 生物學機理 玉米單倍體 轉基因植株 目的植物 其他材料 生產植物 突變單株 育種效率 基因 基因組 誘導率 遺傳學 敲除 自交 突變 雜交 后代 | ||
1.一種生產植物母本單倍體的方法，包括如下步驟：
1）沉默或抑制目的植物基因組中ZmPLA基因的表達或活性或敲除ZmPLA基因，得到轉基因植株；
2）將所述轉基因植株或其后代進行自交或者作為父本與其他材料雜交，得到自交后代或雜交后代，即為植物母本單倍體；
所述沉默或抑制目的植物基因組中ZmPLA基因的表達或活性或敲除ZmPLA基因，為突變目的植物基因組中ZmPLA基因使目的植物基因組中ZmPLA基因發生缺失突變或發生插入突變；
所述使目的植物基因組中ZmPLA基因發生缺失或插入突變為所述使目的植物基因組中ZmPLA基因第一外顯子發生缺失和/或插入突變；
所述使目的植物基因組中ZmPLA基因第一外顯子發生缺失或插入突變的方式為CRISPR/Cas9；
所述CRISPR/Cas9的靶序列為序列3所示的第1外顯子中第264-286位堿基；
所述CRISPR/Cas9的sgRNA序列為序列4；
所述植物為玉米。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述使目的植物基因組中ZmPLA基因第一外顯子發生缺失或插入突變包括如下步驟：將表達所述sgRNA的CRISPR/Cas9載體導入目的植物中，得到轉基因植物。
3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于：
步驟2）中，還包括如下步驟：將所述自交后代或所述雜交后代單株進行單倍體性狀鑒定、葉片倍性鑒定和/或分子標記鑒定，選取任一種方法鑒定為單倍體的后代單株為植物母本單倍體。
4.由權利要求1-3中任一所述的方法生產的植物母本單倍體。
5.權利要求1-3中任一所述的方法或權利要求4所述的植物母本單倍體在雙單倍體系選育或基于雙單倍體系選育系的雜交種選育中的應用。
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