[發明專利]具有抑制登革病毒復制作用的短肽及其應用

有效

• 申請號: 201810022857.1
• 申請日: 2018-01-10
• 公開（公告）號: CN108395470B
• 公開（公告）日: 2020-10-09
• 發明（設計）人: 王明連;張婷;李勁松;王群;楊怡姝;李勁濤;王小利
• 申請（專利權）人: 北京工業大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K5/09;C07K5/11;A61K38/08;A61P31/14
• 代理公司: 北京鼎承知識產權代理有限公司 11551
• 代理人: 田恩濤;柯宏達

本發明涉及病毒學領域，具體公開了一種具有抑制登革病毒復制作用的短肽及其應用。本發明所提供的短肽的氨基酸序列為KHGHHRH，即Lys?His?Gly?His?His?Arg?His。所述短肽具有與NS5高特異性的親和能力，具有高效抑制登革病毒復制的作用，其抗病毒作用不僅限于DENV?2，對于1型、3型和4型登革病毒的復制也同樣具有顯著的抑制作用。在該短肽序列的兩端各添加1個半胱氨酸，可通過兩端的半胱氨酸將短肽環化，形成環肽。所得到的環肽增強了抑制登革病毒復制的作用，可用于登革病毒感染的特異性治療。

技術領域

本發明涉及病毒學領域，具體地說，涉及采用基因工程和噬菌體展示肽庫技術獲得的具有抑制登革病毒復制作用的短肽。

背景技術

登革病毒(DENV)可引起登革熱、登革出血熱和登革休克綜合征，廣泛流行于熱帶和亞熱帶地區，是分布最廣、發病最多、危害較大的傳染病，在全世界范圍內每年約有3.9億人受感染，近1億人表現出感染癥狀，其中大部分為登革熱病例，登革出血熱病例和登革休克綜合癥約50多萬例，年均因登革病毒感染的死亡數為2萬2千多例，以少兒居多(WorldHealth Organization，2009；Bhatt et al.，2013；Guzman and Harris，2015)。登革病毒感染所致的傳染病在亞洲、太平洋群島及中、南美洲許多國家造成嚴重危害，在我國也已經從輸入性、散發性疾病成為常年均有發生的疾病，在臺灣、香港和廣東等南部地區常年流行，如2014年僅發生于廣州的一次流行就有4萬病例。

DENV屬黃病毒科黃病毒屬，分為四個血清型，分別為DENV 1-4，均可對人類造成致病性，其中DENV 2是傳播最廣泛的血清型，感染后的重癥率及病死率也均高于其他型別。美國德克薩斯大學醫學中心的病毒學家Nikos等在近年馬來西亞的一次登革熱流行后，分離一病毒株，并經全基因組測序發現這是一新型的登革病毒，這種馬來登革病毒是否會在人群中持續的傳播和流行尚不可知(Normile D.2013.Science.342:415)，是否將其定義為DENV 5尚有待探討。

DENV以雌蚊為傳播媒介，主要是埃及伊蚊和白紋伊蚊。雌蚊叮咬DENV感染者后，病毒在蚊體內增殖，再次叮咬人后引起病毒傳播和被叮者感染。人群對任何一型DENV的初次感染均較敏感，感染后獲得對同型病毒1-4年的免疫力，而對異型病毒的免疫力則很短暫，只維持2-12個月。因而感染一個型別DENV后還可能發生二次或連續感染，而繼發異型病毒感染引起登革出血熱和登革休克綜合征的發病率和病死率更高。這是由于在繼發異型病毒感染中預先存在的交叉抗體能夠與病毒結合，通過抗體與靶細胞表面的Fc受體的相互作用促進病毒對包括單核細胞、巨噬細胞以及成熟樹突狀細胞在內的靶細胞的感染性，進而引起血液濃縮、出血或便血甚至休克等臨床癥狀，登革出血熱患者在發熱階段與登革熱類似，而在退燒后病人體征出現迅速惡化，并出現出血癥狀，甚至出現低血容量性休克，病程較短但也較為致命，這種二次感染后的抗體依賴的感染增強作用(Antibody dependentenhancement，ADE)是DENV感染致病性的一個特征，也是病毒疫苗研發的主要障礙。因為如果疫苗不能對所有型別的病毒都產生足夠的保護性抗體，將會加重異型病毒的感染。而且，一旦有新的型別病毒出現，疫苗也將可能被廢棄。因此，法國藥企賽諾菲巴斯德在經過幾十年的研發后，推出的全球第一支嵌合的登革熱四價疫苗于2016年1月在墨西哥和菲律賓等國獲許上市不久，其安全性和保護性就被世界衛生組織和已經使用的幾個國家共同警示，特別是在兒童中，接種過該疫苗的兒童患上重癥登革熱的幾率反而高于未曾接種過的兒童(WHO，2017；Aguiar et al.，2016；Flasche et al.，2016；Halstead，2016；Halstead andRussell，2016；Wilder-Smith et al.，2016)，人們剛剛看到的曙光隨即黯淡。