[發(fā)明專(zhuān)利]一種聚合揚(yáng)稻4號(hào)的三個(gè)紋枯病抗性基因的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810017008.7
• 申請(qǐng)日: 2018-01-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108103222A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-06-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊長(zhǎng)登;曾宇翔;季芝娟;梁燕
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)水稻研究所
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/6895
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/6895;A01H1/02;A01H1/04
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明公開(kāi)了一種聚合揚(yáng)稻4號(hào)的三個(gè)紋枯病抗性基因的方法。該方法是利用D130B、D467、D948三個(gè)標(biāo)記分別PCR擴(kuò)增Lemont和揚(yáng)稻4號(hào)組配的重組自交系分離群體內(nèi)的不同株系，將D130B標(biāo)記擴(kuò)增揚(yáng)稻4號(hào)的帶型命名為A、擴(kuò)增Lemont的帶型命名為D，將D467標(biāo)記擴(kuò)增揚(yáng)稻4號(hào)的帶型命名為B、擴(kuò)增Lemont的帶型命名為E，將D948標(biāo)記擴(kuò)增揚(yáng)稻4號(hào)的帶型命名為C、擴(kuò)增Lemont的帶型命名為F。選擇攜帶A、B、C三種帶型數(shù)目越多的株系即是越抗紋枯病的株系，選擇攜帶D、E、F三種帶型數(shù)目越多的株系即是越感紋枯病的株系。該方法可同時(shí)聚合3個(gè)揚(yáng)稻4號(hào)的紋枯病抗性基因以選育抗紋枯病的水稻材料，可大大提高育種效率。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種聚合揚(yáng)稻4號(hào)的三個(gè)紋枯病抗性基因的方法，該方法可利用3個(gè)分子標(biāo)記同時(shí)聚合3個(gè)揚(yáng)稻4號(hào)的紋枯病抗性基因以選育抗紋枯病的水稻材料。

背景技術(shù)

水稻是關(guān)乎我國(guó)糧食安全的重要糧食作物。我國(guó)水稻育種界選育紋枯病抗病水稻的傳統(tǒng)方法都是通過(guò)表型選擇進(jìn)行的，即用紋枯病致病菌在不同的水稻發(fā)育時(shí)期對(duì)水稻單株進(jìn)行接種鑒定。由于傳統(tǒng)的接種鑒定大部分是在田間種植條件下進(jìn)行的，接種鑒定的結(jié)果誤差大，準(zhǔn)確性差，而且不同年份的接種結(jié)果存在差異，導(dǎo)致接種鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確率低。通過(guò)分子標(biāo)記對(duì)水稻紋枯病抗性相關(guān)基因進(jìn)行選擇可以在水稻苗期即對(duì)紋枯病抗性進(jìn)行選擇，選擇的準(zhǔn)確率高，可以大大提高育種效率。水稻的紋枯病抗性是一個(gè)數(shù)量性狀，受多個(gè)數(shù)量性狀基因座位(QTL)控制。水稻科研界目前已經(jīng)定位出許多與水稻紋枯病抗性相關(guān)的QTL，但是哪些QTL是共同調(diào)控水稻紋枯病抗性的？哪些QTL可以同時(shí)應(yīng)用在一個(gè)育種過(guò)程中？我們對(duì)這些問(wèn)題的了解并不多。根據(jù)目前已經(jīng)報(bào)道的與水稻紋枯病抗性基因連鎖的分子標(biāo)記隨意將不同的幾個(gè)抗性基因聚合在一起，希望獲得抗性加強(qiáng)的水稻材料這樣一個(gè)美好的想法在實(shí)際操作過(guò)程中往往不可行，因?yàn)殡S意選出的幾個(gè)抗性基因很有可能存在基因之間的上位性互作效應(yīng)，導(dǎo)致聚合了多個(gè)抗性基因的材料的紋枯病抗性反而降低了。為了有效的提高育種效率，加快育種進(jìn)程，本發(fā)明提出一種聚合揚(yáng)稻4號(hào)的三個(gè)紋枯病抗性基因的方法，該方法利用3個(gè)分子標(biāo)記同時(shí)聚合了3個(gè)水稻紋枯病抗性基因，以培育抗紋枯病的水稻新株系，該方法可大大提高育種效率。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明包括以下步驟：

(1)將水稻品種Lemont作為母本與水稻品種揚(yáng)稻4號(hào)作為父本進(jìn)行雜交，并構(gòu)建重組自交系分離群體Fn，所述Fn中的n≥5；

(2)用分子標(biāo)記D130B、D467、D948分別PCR擴(kuò)增步驟(1)獲得的重組自交系分離群體內(nèi)的不同株系的葉片DNA，根據(jù)D130B標(biāo)記與水稻第1染色體上的紋枯病抗性基因qSBRLEYD1A連鎖的特點(diǎn)，根據(jù)D467標(biāo)記與水稻第4染色體上的紋枯病抗性基因qSBRLEYD4A連鎖的特點(diǎn)，根據(jù)D948標(biāo)記與水稻第9染色體上的紋枯病抗性基因qSBRLEYD9A連鎖的特點(diǎn)，將D130B、D467、D948標(biāo)記的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物分別進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)，將D130B標(biāo)記擴(kuò)增的揚(yáng)稻4號(hào)的帶型命名為A，將D467標(biāo)記擴(kuò)增揚(yáng)稻4號(hào)的帶型命名為B，將D948標(biāo)記擴(kuò)增揚(yáng)稻4號(hào)的帶型命名為C，將D130B標(biāo)記擴(kuò)增Lemont的帶型命名為D，將D467標(biāo)記擴(kuò)增Lemont的帶型命名為E，將D948標(biāo)記擴(kuò)增Lemont的帶型命名F；選擇攜帶A、B、C帶型數(shù)目越多的株系即是紋枯病抗性越強(qiáng)的水稻株系，選擇攜帶D、E、F帶型數(shù)目越多的株系即是紋枯病抗性越差的水稻株系。

進(jìn)一步地，所述步驟(2)中，攜帶不同數(shù)目的A、B、C帶型的株系的紋枯病抗性按從強(qiáng)到弱排序?yàn)椋壕酆螦、B、C全部三種帶型的株系＞攜帶A、B、C三種帶型中的任意兩種帶型的株系＞攜帶A、B、C三種帶型中的任意一種帶型的株系＞不攜帶A、B、C三種帶型中的任何一種帶型的株系；需要指出的是，上述排序大小僅適用于種植在同一個(gè)環(huán)境條件下對(duì)同一個(gè)Fn世代的分離群體內(nèi)的株系進(jìn)行比較，所述Fn中n為固定數(shù)值。