[發(fā)明專利]吲哚咔唑類生物堿衍生物及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810015724.1
• 申請(qǐng)日: 2018-01-08
• 公開（公告）號(hào): CN108329326B
• 公開（公告）日: 2020-07-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬忠俊;王佳楠;丁婉婧
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號(hào): C07D491/22
• 分類號(hào): C07D491/22;C12R1/465
• 代理公司: 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 33200
• 代理人: 陳升華

1.一種吲哚咔唑類生物堿衍生物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將放線菌為Streptomyces sp.CICC 11026接種于高氏一號(hào)液體培養(yǎng)基中，搖床培養(yǎng)，得到接種有放線菌的發(fā)酵培養(yǎng)基；

2)取步驟1)中接種有放線菌的發(fā)酵培養(yǎng)基，接種于大米發(fā)酵培養(yǎng)基中，靜置培養(yǎng)，得到固體發(fā)酵產(chǎn)物；

3)將發(fā)酵產(chǎn)物分離純化得到吲哚咔唑類生物堿衍生物；

所述的吲哚咔唑類生物堿衍生物，為式Ⅰ或/和式Ⅱ結(jié)構(gòu)：

其中，式Ⅰ中R₁為OH，式Ⅱ中R₂為OH。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吲哚咔唑類生物堿衍生物的制備方法，其特征在于，步驟1)中，所述的搖床培養(yǎng)的條件為：20～35℃、100rpm～300rpm搖床培養(yǎng)2～5天。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的吲哚咔唑類生物堿衍生物的制備方法，其特征在于，步驟1)中，所述的搖床培養(yǎng)的條件為：25～30℃、150rpm～210rpm搖床培養(yǎng)3～4天。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吲哚咔唑類生物堿衍生物的制備方法，其特征在于，步驟2)中，所述的大米發(fā)酵培養(yǎng)基由大米、水和海鹽組成，所述的大米、水與海鹽之比為：40g：40mL～80mL：0.5g～3g。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吲哚咔唑類生物堿衍生物的制備方法，其特征在于，步驟2)中，所述的靜置培養(yǎng)的條件為：23～33℃靜置培養(yǎng)60～80天。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的吲哚咔唑類生物堿衍生物的制備方法，其特征在于，步驟2)中，所述的靜置培養(yǎng)的條件為：25～30℃靜置培養(yǎng)68～73天。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吲哚咔唑類生物堿衍生物的制備方法，其特征在于，步驟3)中，所述的分離純化包括：將固體發(fā)酵產(chǎn)物用乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮后常壓凝膠色譜粗分離，得到混合組分；將混合組分通過高效制備液相色譜分離，高效制備液相色譜分離純化，得到式Ⅰ、Ⅱ結(jié)構(gòu)的化合物。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的吲哚咔唑類生物堿衍生物的制備方法，其特征在于，所述的常壓凝膠色譜的條件：采用的填料為羥丙基葡聚糖凝膠，采用的洗脫劑為體積百分?jǐn)?shù)20％-100％的甲醇-水體系；

所述的高效制備液相色譜分離的條件：采用的填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠，采用的流動(dòng)相為體積百分?jǐn)?shù)40％-100％的甲醇-水溶液；

所述的高效制備液相色譜分離純化的條件：采用的填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠，采用的流動(dòng)相為體積百分?jǐn)?shù)30％-40％的乙腈-水溶液。