[發明專利]一種自動記錄大腸桿菌生長曲線的裝置及應用方法

有效

• 申請號: 201810014482.4
• 申請日: 2018-01-08
• 公開（公告）號: CN108459051B
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發明（設計）人: 曲克明;張旭志;張艷;趙俊;陳聚法;丁東生;姜曉瑜
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院黃海水產研究所
• 主分類號: G01N27/02
• 分類號: G01N27/02
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

一種自動記錄大腸桿菌生長曲線的裝置及應用方法，屬于分析測試技術領域，它包括檢測池，所述檢測池的上下左右前后六面皆有保溫層，上頂面保溫層有一排八個圓形孔，所述的圓形孔用于插入培養管，檢測池內部溫度由可調電子溫控器控制，在檢測池內的上中部和下中部分別固定有一排八個電極，兩兩處于一條垂直線上作為一個工作電極對，裝有培養液的培養管從上頂面保溫層上的圓形孔插入工作電極對；檢測池底部設置有進氣針，進氣針正好位于培養管的正下方，進氣針與檢測池外的導氣管相連通。本發明使用電容耦合非接觸電導傳感器采集數據，并采用新型算法進行結果分析，不用光電轉換裝置，儀器簡易，成本低，且測定時不受樣品溶液濁度、散光等影響，可以實現在線、實時監測，且操作簡易。

技術領域

本發明屬于分析測試技術領域，具體地涉及一種自動記錄大腸桿菌生長曲線的裝置及應用方法。

背景技術

對于生長動力學研究、分型、臨床檢驗、生物基因工程、食品衛生檢測等諸多科研、生產、管理與生活活動來講，細菌生長曲線(生長速率)的測定都具有重要意義。

自十八世紀以來，人們發明了多種細菌生長曲線的測定方法，包括經典的菌落計數-時間作圖法、酶聯免疫法、電化學(伏安和阻抗)傳感器法、電化學生物傳感器法、濁度法、基因檢測法(如PCR法)等。這些早期的方法中往往需要按照一定的時間間隔持續取樣，操作繁瑣、周期長、勞動強度大。

近年來，具有更理想功能的光學測定方法得到了廣泛研究與應用。如Hall等開發了一種軟件，可以通過測定培養液OD₆₀₀值來實現高通量測定細菌生長速率(B.G.Hall,H.Acar,A.Nandipati,M.Barlow,Growth Rates Made Easy,Mol.Biol.Evol.,2013,31,232)；McBirney等通過采用多波長散射光源降低了背景噪音及副產物對測定的不利影響，對傳統光密度法(OD₆₀₀)進行了有效改善(S.E.McBirney,K.Trinh,A.Wong-Beringer,A.M.Armani,Using wavelength-normalized optical spectroscopy to improve theaccuracy of bacteria growth rate quantification,Proc.of SPIE,2017,10068,17)；Groisman等將高精密熒光顯微鏡和微流控裝置相結合，開發了一種觀測固定范圍內細菌生長的方法(A.Groisman,C.Lobo,H.Cho,J.K.Campbell,Y.S.Dufour,A.M.Stevens,A.Levchenko,A microfluidic chemostat for experiments with bacterial and yeastcells,Nat.Methods,2005,2,685)。這些基于光學原理的方法具有較好的靈敏度和較高的效率，但是受限于透光度較好的測定體系，而且往往需要貴重儀器和專業實驗室，使用成本較高。