[發(fā)明專利]一株β-氯氰菊酯降解菌及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810014358.8
• 申請日: 2018-01-08
• 公開（公告）號(hào): CN108085281A
• 公開（公告）日: 2018-05-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 賈冬英;蔣肇樣;姚開;趙甲元;遲原龍
• 申請（專利權(quán)）人: 四川大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N1/02;A23L5/20;B09C1/10;C12R1/10
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本發(fā)明公開了一株β?氯氰菊酯降解菌，該菌株為地衣芽孢桿菌B?1（Bacillus licheniformis B?1），其16S rDNA的GenBank登錄號(hào)為HQ009796。該菌株來源于茶園土壤，經(jīng)β?氯氰菊酯濃度梯度馴化、初篩、分離純化、復(fù)篩得到。該菌株菌落邊緣呈微紅色、中央為白色，表面干燥且有褶皺，邊緣不整齊；單個(gè)菌體呈桿狀，革蘭氏陽性，芽孢橢圓、近中生、孢囊稍膨大；葡萄糖、阿拉伯糖、木糖和甘露醇發(fā)酵均呈陽性；能水解明膠和淀粉；苯丙氨酸脫氫酶和卵黃卵磷脂酶陰性；能夠厭氧生長。在適宜條件下，該菌株對培養(yǎng)基中濃度為16.5μg/mL的β?氯氰菊酯降解率為94.12%。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明提供一株β-氯氰菊酯降解菌及其應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

擬除蟲菊酯類農(nóng)藥是一類人工合成的中毒或低毒仿生型殺蟲劑，將是全球未來幾十年內(nèi)使用范圍最廣且難以替代的農(nóng)藥類型之一。目前廣泛用于防治果蔬、茶葉、谷物等的食葉或食果害蟲，其施用面積已占?xì)⑾x劑總施用面積的30％以上，且仍呈上升趨勢。β-氯氰菊酯是擬除蟲菊酯類農(nóng)藥中的常用種類，難溶于水，常溫下其穩(wěn)定期可達(dá)兩年以上。β-氯氰菊酯對某些非靶標(biāo)生物如魚、蝦、蟹等水生生物有強(qiáng)毒性作用，對哺乳動(dòng)物也具有潛在的危害，因此消除環(huán)境中β-氯氰菊酯殘留污染已成為亟待解決的問題。

利用微生物代謝多樣性的特點(diǎn)，對受污染土壤和水體進(jìn)行生物修復(fù)是解決農(nóng)藥殘留污染的重要途徑。微生物降解農(nóng)藥具有效率高、條件溫和、無二次污染等優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)用前景廣闊。目前，已報(bào)道的擬除蟲菊酯類農(nóng)藥降解菌有芽孢桿菌、假單胞菌、產(chǎn)堿桿菌、黑曲霉、酸單胞菌、紅球菌、鞘氨醇桿菌、微球菌和蒼白桿菌等，尚未見地衣芽孢桿菌高效降解β- 氯氰菊酯的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有β-氯氰菊酯微生物降解中存在的不足，提供一株安全高效的β-氯氰菊酯降解菌。

一株β-氯氰菊酯降解菌，其特征在于該菌株的分類名稱為地衣芽孢桿菌B-1(Bacillus licheniformis B-1)，于2016年5月11日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，地址：中國武漢，保藏編號(hào)是CCTCC NO：M 2016258，該菌株16S rDNA的GenBank登錄號(hào)為HQ009796。

一株β-氯氰菊酯降解菌，其特征在于該菌株菌落邊緣呈微紅色、中央為白色，表面干燥且有褶皺，邊緣不整齊。單個(gè)菌體呈桿狀，革蘭氏陽性，芽孢橢圓、近中生、孢囊稍膨大。葡萄糖、阿拉伯糖、木糖和甘露醇發(fā)酵均呈陽性；能水解明膠和淀粉；苯丙氨酸脫氫酶和卵黃卵磷脂酶陰性；能夠厭氧生長。急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，該菌的活菌培養(yǎng)液屬于實(shí)際無毒。

一株β-氯氰菊酯降解菌，其特征在于該菌株來源于茶園土壤，經(jīng)β-氯氰菊酯梯度馴化、初篩、分離純化、復(fù)篩得到。

一株β-氯氰菊酯降解菌，其應(yīng)用在于該菌株降解β-氯氰菊酯的培養(yǎng)基組成(w/v)為酵母膏0.125％、蛋白胨1.0％、葡萄糖0.213％、吐溫-80 0.2％、氯化錳0.0625％、氯化鈉1.0％；培養(yǎng)基中β-氯氰菊酯濃度為16.5μg/mL；培養(yǎng)條件為培養(yǎng)基初始pH 7.5、接種量6.25％(v/v)、培養(yǎng)溫度37℃、培養(yǎng)時(shí)間72h；上述條件下該菌株對β-氯氰菊酯的降解率為94.12％。

通過實(shí)施本發(fā)明的具體技術(shù)指標(biāo)，可達(dá)到以下預(yù)期效果。

已報(bào)道的β-氯氰菊酯降解菌多數(shù)來源于土壤或農(nóng)藥廠污泥，將其直接應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)中殘留農(nóng)藥的降解可能存在安全性問題。本發(fā)明提供的地衣芽孢桿菌B-1是一株安全高效降解菌，可應(yīng)用于農(nóng)作物土壤和畜禽飼料中β-氯氰菊酯殘留的降解，有利于現(xiàn)代農(nóng)業(yè)中綠色無公害農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)。適宜條件下該菌株對β-氯氰菊酯的降解率可達(dá)94.12％。

具體實(shí)施方式

下面舉實(shí)施例說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不限于下述實(shí)施例。