[發明專利]一種rExendin-4藥物活性的檢測試劑盒及檢測方法和應用

在審

• 申請號: 201810013485.6
• 申請日: 2018-01-05
• 公開（公告）號: CN108220383A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 樊欣迎;袁天天;李靜;劉月峰;聞亞磊;程淵
• 申請（專利權）人: 北京博康健基因科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李進

本發明提供了一種rExendin?4藥物活性的檢測試劑盒及檢測方法和應用，屬于醫學檢驗與藥物分析領域。本發明提供的rExendin?4藥物活性的檢測試劑盒，通過簡單的試劑能快速準確的測定rExendin?4藥物活性，將該試劑盒應用到rExendin?4藥物活性，能較好的提高檢測的速度和準確性；rExendin?4藥物活性的檢測方法通過簡單的實驗步驟，快速靈活的反應，測得藥物的活性，具有較大的實際應用價值和社會價值。

技術領域

本發明涉及醫學檢驗和藥物分析領域，具體而言，涉及一種 rExendin-4藥物活性的檢測試劑盒及檢測方法和應用。

背景技術

藥物的研制過程中，生物學活性檢測方法是藥物篩選以及質量控 制的重要評價參數，該方法必須通過方法驗證，滿足專屬性、精密度、 準確度等方法驗證方面的要求，這樣才能保證生物學活性檢測結果的 可靠性，才能用于指導藥物的篩選以及質量控制。

重組促胰島素分泌素(rExendin-4)屬于胰高血糖素樣肽-1 (GLP-1)類藥物，可以控制胰島素和胰高血糖素的分泌。目前常用 的針對rExendin-4的生物學活性測定方法，是酶聯免疫吸附法(EIA 法)，該法依據藥物引發細胞內第二信使cAMP含量上升，通過試劑 盒檢測cAMP來間接反映藥物生物學活性。大鼠胰島素瘤細胞 RIN-m5f作為天然的細胞模型可用于檢測GLP-1類似物的活性,但 RIN-m5f難以培養和生長緩慢,貼壁培養過程中易脫落，使其應用受 到限制。并且在利用cAMP檢測試劑盒檢驗cAMP過程中操作步驟 繁瑣，增加了人為操作引起誤差的風險。實驗響應值不高。更重要的 是，在已經報道的針對GLP-1藥物的生物學活性檢測方法中，缺乏 對檢測體系專屬性、精密度、準確度等方面的方法驗證與評價，難以 確保檢測結果的準確性與可靠性。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種rExendin-4藥物活性的檢測試 劑盒，該試劑盒能方便的用于檢測胰高血糖素樣肽-1(GLP-1)類藥 物的活性。

本發明的第二目的在于提供上述rExendin-4藥物活性的檢測試 劑盒在rExendin-4藥物活性的檢測中的應用。

本發明的第三目的在于提供一種rExendin-4藥物活性的檢測方 法，通過本檢測方法能準確、特異且靈敏的檢測rExendin-4藥物活性， 操作簡單快捷。

為了實現本發明的上述目的，采用以下技術方案：

一種rExendin-4藥物活性的檢測試劑盒，檢測試劑盒包括細胞生 長培養基、分析培養基、質量分數28％-33％的BSA溶液和化學發光 劑。

上述rExendin-4藥物活性的檢測試劑盒在rExendin-4藥物活性的 檢測中的應用。

一種rExendin-4藥物活性的檢測方法，包括：

將rExendin-4活性參考品和rExendin-4供試品分別使用分析培養 基溶解，然后進行倍比稀釋，分別處理熒光效應細胞并培養，得到熒 光反應細胞；

將熒光反應細胞進行室溫平衡后與化學發光劑進行混合反應，測 定熒光反應細胞的熒光數據；

通過熒光數據得到rExendin-4活性參考品和rExendin-4供試品半 數有效濃度值；

通過rExendin-4活性參考品和rExendin-4供試品半數有效濃度值 計算得到rExendin-4供試品的活性數據。