[發明專利]一種縮宮素的純化方法

在審

• 申請號: 201810012441.1
• 申請日: 2018-01-05
• 公開（公告）號: CN108047314A
• 公開（公告）日: 2018-05-18
• 發明（設計）人: 夏星輝;王群芳;胡晶錦
• 申請（專利權）人: 寧波人健藥業集團股份有限公司
• 主分類號: C07K7/16
• 分類號: C07K7/16;C07K1/16;C07K1/14
• 代理公司: 北京馳納智財知識產權代理事務所(普通合伙) 11367
• 代理人: 陳常美

1.一種縮宮素的純化方法，包括以下步驟：

步驟（1）、收集液氨進行真空干燥；

步驟（2）、干燥后的反應瓶中加入酸溶液，溶解干粉；

步驟（3）、在步驟（2）得到的液體中下部通入空氣或氧氣進行氧化，得到縮宮素溶液中間體；

步驟（4）、通過高相液相色譜柱對縮宮素溶液中間體進行純化；

步驟（5）、將步驟（4）收集到的有效組分洗脫液進行旋轉蒸發。

2.根據權利要求1所述的縮宮素的純化方法，其特征在于：步驟（1）中收集液氨的具體做法為：液氨至反應瓶中，加入九肽中間體、氯化銨至反應瓶中，攪拌溶解得清液。

3.根據權利要求1所述的縮宮素的純化方法，其特征在于：步驟（1）中真空干燥的具體做法為：開啟真空泵，待揮發出的氨氣抽光，控制真空度，以不抽出液體為宜，直到液體抽干，反應瓶壁白色粉末脫落。

4.根據權利要求1所述的縮宮素的純化方法，其特征在于：步驟（2）中干燥后的反應瓶中加入酸溶液后，溶解干粉并稀釋，調節pH后，將溶液吸入到玻璃反應釜中。

5.根據權利要求1所述的縮宮素的純化方法，其特征在于：步驟（2）中酸溶液為2%-4%的冰醋酸溶液。

6.根據權利要求1所述的縮宮素的純化方法，其特征在于：步驟（3）中氧化時控制溫度10-35℃，通空氣或氧氣6-12小時進行氧化。

7.根據權利要求1所述的縮宮素的純化方法，其特征在于：步驟（4）中純化的方法包括以下步驟：

步驟(4.1)、乙酸水溶液作為流動相A，異丙醇作為流動相B，色譜工作站設定線性流速為150-300cm/h,設定紫外檢測波長為280nm，用流動相A沖洗；

步驟(4.2)、將A泵的溶劑過濾頭放入縮宮素溶液中間體中，設定線性流速為150-300cm/h，開始上樣，上樣結束，停A泵，將A泵的溶劑過濾頭放入裝有流動相A的器皿中，設定線性流速為150-300cm/h，用流動相A對濾頭進行沖洗；

步驟(4.3)、開始梯度洗脫，分段收集有效成分，完成純化。

8.根據權利要求7所述的縮宮素的純化方法，其特征在于：步驟(4.3)中分段收集的具體方法為：在主峰迅速上升時開始收集主峰組分，當主峰下降至出現拐點時開始分段收集，在出現較大雜質峰的上升處停止收集，繼續進行梯度洗脫，根據圖譜將拐點前的分段收集的有效成分合并入大樣，拐點后的收集液棄去，完成純化步驟。

9.根據權利要求1所述的縮宮素的純化方法，其特征在于：步驟（5）旋轉蒸發的具體方法為：將步驟（4）收集到的有效組分洗脫液合并，按樣品上柱的收集時間判斷收集量，并根據合并組分的起終點估算出合并液的體積；將樣品液倒入旋蒸瓶中，開啟旋轉蒸發儀，設定水浴溫度，開啟真空泵和冷卻水，調節調速旋鈕，開始旋蒸，直至旋蒸完所有有效組分。