[發明專利]CpG寡脫氧核苷酸、免疫組成物及其用途

有效

• 申請號: 201810004758.0
• 申請日: 2018-01-03
• 公開（公告）號: CN109593765B
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 莊宗顯;葉大瑋;賴朝陽;劉奕玲;呂志豪
• 申請（專利權）人: 財團法人衛生研究院
• 主分類號: C12N15/117
• 分類號: C12N15/117;A61K39/39;A61P35/00;A61P31/20;A61P31/04;A61P31/22;A61P31/16;A61P33/06
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 湯在彥

本發明提供一種CpG寡脫氧核苷酸(CpG?ODN)，CpG?ODN包含一個或多個重復的GTCGTT序列、一個或多個重復的GTT序列、以及一個或多個重復的TTTT序列，其中至少一個重復的GTCGTT序列是編碼在GTT序列及TTTT序列之間。本發明還包含CpG?ODN的免疫組成物及其在制備治療或預防宿主疾病的免疫反應的藥物用途。

技術領域

本發明涉及CpG-寡脫氧核苷酸(CpG-ODN)、包含其的免疫組成物以及藉其誘發免疫反應的方法，具體而言，是涉及一種用于誘發TLR9-活化免疫反應和/或一種TLR-21-活化免疫反應且包含GTCGTT片段的CpG-ODN、包含其的免疫組成物以及藉其誘發該些免疫反應的方法。

背景技術

CpG-寡脫氧核苷酸(CpG-ODN)為已知具有潛力的免疫調控者，其誘發發炎性細胞介素及輔助型T細胞1(Th1)極化免疫反應，導致抗原呈現細胞中的共刺激分子的表現以及增加的B細胞、T細胞、自然殺手細胞、及其他免疫細胞的活化情況。

通常，不同的CpG-ODN基于其組成及長度而具有種族特異性活性。舉例而言，含有兩重復的GACGTT片段且長度為20個核苷酸的CpG-1826(SEQ ID NO:4)相較于含有三重復的GTCGTT片段且長度為22個核苷酸的CpG-2007(SEQ ID NO:11)，對小鼠細胞的活化較為有力，而對人類細胞的活化效率較低。因此，已有設計并人工合成用于誘發特定物種中特定受體的免疫反應的不同種類的CpG-ODN。

另一方面，通過CpG-PDN活化的目標受體的選擇亦為降低成本及普及以CpG-ODN為基礎之治療的重點。許多研究者已發現，由于類鐸受體(TLR)在先天免疫系統中所扮演的重要角色，利用其作為在宿主內通過CpG-ODN誘發的目標可為較佳的選擇。舉例而言，斑馬魚(Daniorerio)、河豚(Takifugu rubripes)、以及雞(Gallus gallus)中的TLR21顯示出其可被CpG-ODN所活化(Brownlie R.et al.Molecular immunology.2009；46(15):3163-70)。

然而，不同的物種表現不同類型的TLR，其可在適用于對應物種之不同類型的CpG-ODN的開發上造成非必要的成本。因此，開發可誘發復數種類型的TLR的，亦即可誘發不同物種之免疫反應，且具有較佳活化效果的單一CpG-ODN為上述問題實質上的解決方法。

發明內容

在本發明中，表現TLR21及TLR9兩者的石斑魚細胞及表現TLR9的哺乳類細胞系用于本發明的CpG-ODN的活化效應測試中，以呈現該CpG-ODN為有力于通過活化不同類型的TLR以誘發不同物種中免疫反應。

在本發明中，提供一種CpG寡脫氧核苷酸(CpG-ODN)，其是用于誘發宿主內TLR9-活化免疫反應、TLR21-活化免疫反應或其組合，包含：一個或多個重復的GTCGTT序列、一個或多個重復的GTT序列、以及一個或多個重復的TTTT序列，其中至少一個重復的GTCGTT序列是編碼在GTT序列及TTTT序列之間。

優選地，CpG-ODN包含如SEQ ID NO:1所示的序列。

優選地，CpG-ODN的長度為19個核苷酸。

優選地，CpG-ODN包含如SEQ ID NO:2所示的序列。

優選地，CpG-ODN包含如SEQ ID NO:3所示的序列。

優選地，宿主是選自由人類、禽鳥類、嚙齒類及魚類所組成的群組中。

本發明提供一種免疫組成物，其是用于誘發TLR9-活化免疫反應、TLR21-活化免疫反應或其組合，包含：一種CpG-ODN，其包含：一個或多個重復的GTCGTT序列；一個或多個重復的GTT序列；以及一個或多個重復的TTTT序列，其中至少一個重復的GTCGTT序列是編碼在GTT序列及TTTT序列之間；以及載體、賦形劑或其組合。