[發明專利]一種使用透明質酸包裹的金納米粒子評價煙氣暴露對細胞損傷的方法

有效

• 申請號: 201810003826.1
• 申請日: 2018-01-03
• 公開（公告）號: CN108120705B
• 公開（公告）日: 2020-07-21
• 發明（設計）人: 田永峰;張玉豐;楊柳;段沅杏;趙偉;趙楊;朱東來;湯建國;張霞;韓熠;鞏效偉;洪鎏;李壽波;王程婭;李廷華;袁大林;王汝;曾旭;孫志勇;陳永寬;繆明明
• 申請（專利權）人: 云南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02;G01N21/64
• 代理公司: 北京市領專知識產權代理有限公司 11590
• 代理人: 楊兵

1.一種使用透明質酸包裹的金納米粒子評價煙氣暴露對細胞損傷的方法，其特征在于，包括如下步驟：

A、將金納米粒子充分分散于透明質酸膠體水溶液中，然后對混合物進行冷凍噴霧干燥，得到分散的表面包覆有透明質酸水凝膠的金納米粒子，即為所述透明質酸包裹的金納米粒子；金納米粒子本身具有熒光介質的屬性，在基因檢測中提供熒光；所述金納米粒子為棒狀納米粒子，其長度為20-50nm，其直徑為8-30nm；

B、將含有受試細胞的培養液均分為兩份，一份直接加入所述透明質酸包裹的金納米粒子，所述透明質酸包裹的金納米粒子能夠與活體細胞中的mRNA結合，進而結合有所述透明質酸包裹的金納米粒子的mRNA通過堿基互補配對原則進行基因雜交形成mRNA-DNA，結合有所述透明質酸包裹的金納米粒子的mRNA-DNA在氬離子激光器發出激光的照射下能發生金納米粒子外層電子躍遷，從而發出熒光；在充分反應后，測定的熒光強度記為初始熒光強度；

C、向另一份含有受試細胞的培養液中加入含有煙氣捕集物的待測溶液，并在適合細胞存活的溫度下靜置足夠長時間后，再加入所述透明質酸包裹的金納米粒子，由于所述透明質酸包裹的金納米粒子能夠與活體細胞中的mRNA結合，進而結合有所述透明質酸包裹的金納米粒子的mRNA通過堿基互補配對原則進行基因雜交形成mRNA-DNA，而死去的細胞則不會發生上述過程；檢測熒光強度并與初始熒光強度相比較，從而檢測存活細胞的比例，并根據存活細胞的比例來評價煙氣捕集物的細胞毒性。