[發(fā)明專利]聯(lián)合嵌合抗原受體、表達載體、慢病毒及T細胞

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810001146.6
• 申請日: 2018-01-02
• 公開（公告）號: CN109988242A
• 公開（公告）日: 2019-07-09
• 發(fā)明（設計）人: 張同存;顧潮江;廖興華
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢波睿達生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;A61P35/00
• 代理公司: 北京匯澤知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11228
• 代理人: 張濤

本發(fā)明公開了一種聯(lián)合嵌合抗原受體、表達載體、慢病毒及T細胞，聯(lián)合嵌合抗原受體包括嵌合蛋白CAR19和嵌合蛋白CAR22，所述CAR19是由至少包括特異性識別CD19的單鏈抗體和T細胞活化基序兩種蛋白的片段偶聯(lián)而成；所述CAR22是由至少包括特異性識別CD22的單鏈抗體和T細胞活化基序兩種蛋白的片段偶聯(lián)而成。另外，表達載體、慢病毒及T細胞均是基于CART技術(shù)原理，聯(lián)合CAR19T和CAR22T序貫回輸，來有效降低之前CAR19T高復發(fā)的情況，以及防止CAR19T的重度CR。為腫瘤疾病提供更加有效的治療途徑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)學領(lǐng)域，涉及兩種與CD19和CD22結(jié)合的配體，具體來說是與CD19和CD22有關(guān)的聯(lián)合嵌合抗原受體、表達載體、慢病毒及T細胞。

背景技術(shù)

腫瘤免疫治療

腫瘤免疫治療的理論基礎(chǔ)是免疫系統(tǒng)具有識別腫瘤相關(guān)抗原、調(diào)控機體攻擊腫瘤細胞(高度特異性的細胞溶解)的能力。這個生物過程十分復雜，目前仍處于研究之中。上世紀90年代，多個科研小組已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了腫瘤抗原(tumor antigens)，T淋巴細胞可以通過主要組織相容性復合體(major histocompatibility complex，MHC)依賴性方式識別這些腫瘤抗原。

腫瘤免疫治療通常分為兩類，非特異性免疫和特異性免疫。非特異性免疫治療主要包括白細胞介素-2(interleμkin-2，IL-2)，干擾素α(interferonα，IFN-α)，腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor，TNF-α)，卡介苗等細胞因子和毒素，過繼性細胞免疫治療等。特異性免疫治療主要是腫瘤疫苗。

腫瘤非特異性免疫治療

非特異性免疫應答是與生俱來的，它的形成并不需要抗原刺激，能廣泛地針對多種抗原，是免疫應答的基礎(chǔ)，但特異性不強，對某種特定抗原物質(zhì)往往不能產(chǎn)生足夠強度的反應非特異性的免疫治療。在進入臨床試驗的多種細胞因子中，白細胞介素-2和干擾素應用最為廣泛[Rosenberg S A，Lotze M T，Mμμl L M，et al.A progress report on thetreatment of 157patients with advanced cancerμsing lymphokine-activatedkiller cells and interleμkin-2or high-dose interleμkin-2alone[J].N Engl JMed，1987，316(15):889－897]。

腫瘤單克隆抗體的免疫治療

近20多年來單克隆抗體已在腫瘤治療領(lǐng)域得到廣泛應用。抗腫瘤單抗藥物一般包括兩類：一是抗腫瘤單抗，二是抗腫瘤單抗偶聯(lián)物，或稱免疫偶聯(lián)物。免疫偶聯(lián)物分子由單抗與“彈頭”藥物兩部分組成，“彈頭”主要包括放射性核素、藥物和毒素，與單抗連接后分別構(gòu)成放射免疫偶聯(lián)物、化學免疫偶聯(lián)物和免疫毒素。在1997年11月和1998年10月美國FDA分別通過了用于臨床腫瘤治療的兩個單抗—Ritμximab(ritμxan)和Trastμzμmab(herceptin)[Dillman R O.Magic bμllets at last！Finally—approval of amonoclonal antibody for the treatment ofcancer[J].Cancer Biother Radiopharm，1997，12:223－225.]。目前認為單抗的作用機制有阻斷作用、信號傳導作用以及靶向作用等三種作用機制，沒有直接的殺傷作用。另外還存在藥理學方面的問題，主要是到達腫瘤的藥量不足。由于偶聯(lián)物是異體蛋白，會被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)攝取，有相當數(shù)量將積聚于肝、脾和骨髓。偶聯(lián)物是大分子物質(zhì)，通過毛細血管內(nèi)皮層及穿透腫瘤細胞外間隙均受到限制。

腫瘤的過繼免疫治療