[發(fā)明專利]用于對(duì)阿爾茨海默病的鑒別診斷的組合測(cè)試

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201780082303.4
• 申請(qǐng)日: 2017-11-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110168374A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-08-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: K.格沃特;A.納伯斯;J.沙爾特納
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 波鴻魯爾大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68
• 代理公司: 北京市柳沈律師事務(wù)所 11105
• 代理人: 劉國(guó)軍;鄒宗亮

1.用于將阿爾茨海默病鑒別診斷和亞分類分為不同疾病階段的方法，其通過(guò)直接分析體液中可溶性淀粉樣-β(Aβ)肽級(jí)分和可溶性Tau蛋白級(jí)分的二級(jí)結(jié)構(gòu)分布，包括以下步驟：

(a)在包含第一紅外傳感器元件的第一IR池中傳導(dǎo)至少一通量的具有可溶性Aβ肽的體液，所述第一紅外傳感器元件具有內(nèi)部反射元件，所述內(nèi)部反射元件具有紅外透明材料的芯和至少一種直接接枝到所述芯的至少一個(gè)表面的Aβ肽的受體，所述Aβ肽的至少一種受體為能夠特異性和構(gòu)象獨(dú)立地結(jié)合Aβ肽的抗體，并且通過(guò)短硅烷接頭的硅烷化或通過(guò)短硫醇接頭的硫醇化直接接枝到所述內(nèi)部反射元件的至少一個(gè)表面上，使所述至少一種受體的可自由接近的胺基與短硅烷/硫醇接頭上的胺反應(yīng)性基團(tuán)反應(yīng)，并用不與Aβ肽交叉反應(yīng)的阻斷物質(zhì)阻斷短硅烷/硫醇接頭上的剩余胺反應(yīng)性基團(tuán)，使IR光束通過(guò)所述第一IR池，并從其獲得紅外光譜；

(b)在包含第二紅外傳感器元件的第二IR池中傳導(dǎo)至少一通量的具有可溶性Tau蛋白的體液，所述第二紅外傳感器元件具有內(nèi)部反射元件，所述內(nèi)部反射元件具有紅外透明材料的芯和至少一種直接接枝到所述芯的至少一個(gè)表面的Tau蛋白的受體，所述Tau蛋白的至少一種受體為能夠特異性和構(gòu)象獨(dú)立地結(jié)合Tau蛋白的抗體，并且通過(guò)短硅烷接頭的硅烷化或通過(guò)短硫醇接頭的硫醇化直接接枝到所述內(nèi)部反射元件的至少一個(gè)表面上，使所述至少一種受體的可自由接近的胺基與短硅烷/硫醇接頭上的胺反應(yīng)性基團(tuán)反應(yīng)，并用不與Tau蛋白交叉反應(yīng)的阻斷物質(zhì)阻斷短硅烷/硫醇接頭上的剩余胺反應(yīng)性基團(tuán)；使IR光束通過(guò)所述第二IR池，并從其獲得紅外光譜；和

(c)分析獲得的紅外光譜以確定所述體液中可溶性Aβ肽和可溶性Tau蛋白的二級(jí)結(jié)構(gòu)分布以用于鑒別診斷，其中Aβ肽和/或Tau蛋白的酰胺I帶的向下位移指示疾病階段。

2.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述第一和第二IR池的紅外透明材料獨(dú)立地選自硅、鍺、硒化鋅、硒化鎵和金剛石，并且優(yōu)選為鍺。

3.權(quán)利要求1所述的方法，其中所述第一和第二紅外傳感器元件包含鍺內(nèi)部反射元件，該鍺內(nèi)部反射元件具有梯形或平行四邊形形狀并且在紅外線中是透明的，具有足夠的信噪比以檢測(cè)酰胺I帶，且所述Aβ肽或所述Tau蛋白的至少一種受體分別是能夠特異性和構(gòu)象獨(dú)立地結(jié)合Aβ肽或Tau蛋白的抗體，并且通過(guò)短硅烷接頭的硅烷化或通過(guò)短硫醇接頭的硫醇化直接接枝到所述內(nèi)部鍺反射元件的至少一個(gè)表面上，使所述至少一種受體的可自由接近的胺基與短硅烷/硫醇接頭上的胺反應(yīng)性基團(tuán)反應(yīng)，并用分別不與Aβ肽或Tau蛋白交叉反應(yīng)的阻斷物質(zhì)阻斷短硅烷/硫醇接頭上的剩余胺反應(yīng)性基團(tuán)。

4.權(quán)利要求1或3所述的方法，其中所述內(nèi)反射元件

(i)是鍺單晶，優(yōu)選為梯形切口鍺單晶；和/或

(ii)允許或提供多于一路紅外線通過(guò)反射元件；和/或

(iii)進(jìn)一步適用于通過(guò)另一種光學(xué)方法進(jìn)行的替代或平行分析，該另一種光學(xué)方法包括檢測(cè)不同波長(zhǎng)的熒光；和/或

(iv)不與所述Aβ肽或所述Tau蛋白交叉反應(yīng)的阻斷物質(zhì)選自酪蛋白、乙醇胺、L-賴氨酸、聚乙二醇、白蛋白及其衍生物。