[發明專利]抑制畸胎瘤形成的多能干細胞衍生的神經前體細胞的制備方法在審
| 申請號： | 201780081462.2 | 申請日： | 2017-12-20 |
| 公開（公告）號： | CN110139928A | 公開（公告）日： | 2019-08-16 |
| 發明（設計）人： | 曺明洙;林美善;池素蓮 | 申請（專利權）人： | 第一藥品株式會社 |
| 主分類號： | C12N5/0793 | 分類號： | C12N5/0793;C12N5/00 |
| 代理公司： | 北京清亦華知識產權代理事務所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 宋融冰 |
| 地址： | 韓國*** | 國省代碼： | 韓國;KR |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 神經前體細胞 制備 畸胎瘤 多能干細胞 存活率 回收率 細胞 | ||
1.一種抑制畸胎瘤形成的神經前體細胞的制備方法，其特征在于，包括：
步驟1)，對神經前體細胞進行單細胞化；
步驟2)，對在上述步驟1)的單細胞化的神經前體細胞進行再凝集；以及
步驟3)，對在上述步驟2)的再凝集的神經前體細胞進行回收。
2.根據權利要求1所述的抑制畸胎瘤形成的神經前體細胞的制備方法，其特征在于，上述抑制畸胎瘤形成的神經前體細胞的制備方法使用含有N-2添加劑、bFGF或其混合物的培養基作為細胞的培養用培養基。
3.根據權利要求2所述的抑制畸胎瘤形成的神經前體細胞的制備方法，其特征在于，上述N-2添加劑的添加量為0.5％(v/v)至2.0％(v/v)。
4.根據權利要求2所述的抑制畸胎瘤形成的神經前體細胞的制備方法，其特征在于，上述bFGF的添加量為0.0002％(w/v)至0.001％(w/v)。
5.根據權利要求1所述的抑制畸胎瘤形成的神經前體細胞的制備方法，其特征在于，上述步驟1)在涂敷有底物的培養皿中進行。
6.根據權利要求5所述的抑制畸胎瘤形成的神經前體細胞的制備方法，其特征在于，上述底物為選自由層粘連蛋白、L-鳥氨酸、基質膠及CeLLstart組成的組中的一種以上。
7.根據權利要求1所述的抑制畸胎瘤形成的神經前體細胞的制備方法，其特征在于，所述步驟2)在未涂敷有底物的培養皿中進行。
8.根據權利要求1所述的抑制畸胎瘤形成的神經前體細胞的制備方法，其特征在于，上述步驟3)的再凝集的神經前體細胞的直徑為10μm至80μm。
9.一種神經前體細胞，其特征在于，通過根據權利要求1所述的抑制畸胎瘤形成的神經前體細胞的制備方法制備而成。
10.一種神經細胞的分化方法，其特征在于，包括：
步驟1)，對神經前體細胞進行單細胞化；
步驟2)，對在上述步驟1)的單細胞化的神經前體細胞進行再凝集；
步驟3)，對在上述步驟2)的再凝集的神經前體細胞進行回收；以及
步驟4)，將在上述步驟3)的回收的神經前體細胞分化為神經細胞。
11.根據權利要求10所述的神經細胞的分化方法，其特征在于，上述分化在加入B27來代替bFGF的培養基中進行。
12.根據權利要求11所述的神經細胞的分化方法，其特征在于，上述B27的添加量為1％(v/v)至3％(v/v)。
13.根據權利要求10所述的神經細胞的分化方法，其特征在于，在上述神經前體細胞直徑為500μm以上時進行傳代。
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