[發明專利]通過受控樣品蒸發制備無損冷凍載網

有效

• 申請號: 201780076600.8
• 申請日: 2017-10-17
• 公開（公告）號: CN110062880B
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發明（設計）人: 托馬斯·布朗;斯特凡·阿諾爾德;亨寧·施塔爾貝格
• 申請（專利權）人: 巴塞爾大學
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/44;G01N1/42
• 代理公司: 成都超凡明遠知識產權代理有限公司 51258
• 代理人: 魏彥;洪玉姬

用于制備樣品的方法，其中在載體結構上將該樣品提供為薄膜；將載體結構的溫度調節到高于環境露點溫度的值以減小膜厚度，將光指向載體結構，測量透射光的強度值，并根據測量的強度值將載體結構自動插入液體冷凍劑中。本申請還涉及一種系統，該系統包括載體結構、用于將載體結構保持在預限定溫度的溫控平臺、用于將載體結構移動到包含液體冷凍劑的容器中的轉移機構、光源、用于測量透射光的強度值的光電檢測器，以及用于根據所測量的強度值觸發轉移機構的控制裝置。

背景技術

本發明涉及一種用于制備電子顯微鏡的樣品的制備方法及相應的系統。

技術領域

近年來，玻璃化樣本的透射電子顯微鏡(transmission electron microscopy,TEM)(cryo-EM；Dubochet,J.,Adrian,M.,Chang,J.J.,Homo,J.C.,Lepault,J.,McDowall,A.W.,Schultz,P.,1988.Cryo-electron microscopy of vitrifiedspecimens.Q.Rev.Biophys.21,129-228)已經成為用于生物物質的高分辨率結構分析的強有力的技術(Liao,M.,Cao,E.,Julius,D.,Cheng,Y.,2013.Structure of the TRPV1 ionchannel determined by electron cryo-microscopy.Nature 504,107-112)，并且現在越來越多地被認為是生物學中的主流工具(Callaway,E.,2015.The revolution will notbe crystallized:a new method sweeps through structural biology.Nature 525,172-174；Kuhlbrandt,W.,2014.Biochemistry.The resolution revolution.Science343,1443-1444；Nogales,E.,2015.The development of cryo-EM into a mainstreamstructural biology technique.Nat.Methods 13,24-27.)。一些技術成果使這種研究成為可能，最突出的是最近引入的直接電子檢測(direct electron detection，DED)相機，以及改進的數據處理算法的可用性(Grigorieff,N.,2007.FREALIGN:high-resolutionrefinement of single particle structures.J.Struct.Biol.157,1 17-125；Lyumkis,D.,Brilot,A.F.,Theobald,D.L.,Grigorieff,N.,2013.Likelihood-basedclassification of cryo-EM images using FREALIGN.J.Struct.Biol.183,377-388；Scheres,S.H.W.,Chen,S.,2012.Prevention of overfitting in cryo-EM structuredetermination.Nat.Methods 9,853-854)。