[發明專利]確定腫瘤樣品中存在靶抗原的方法

有效

• 申請號: 201780076410.6
• 申請日: 2017-12-11
• 公開（公告）號: CN110114674B
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發明（設計）人: M·蓋格爾;C·克萊因
• 申請（專利權）人: 豪夫邁·羅氏有限公司
• 主分類號: C07K16/28
• 分類號: C07K16/28
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 胡志君;黃革生

1.確定腫瘤樣品中存在靶抗原的體外方法，包括步驟：

i)提供腫瘤樣品；

ii)提供報道細胞，所述報道細胞包含信號轉導性細胞表面受體控制下的報道基因；

iii)向腫瘤樣品添加雙特異性抗體，所述雙特異性抗體包含：

a)能夠與靶抗原特異性結合的第一抗原結合部分；

b)能夠與信號轉導性細胞表面受體特異性結合的第二抗原結合部分；和

c)通過蛋白酶可切割接頭與第二抗原結合部分共價連接的掩蔽部分，其中掩蔽部分能夠與第二抗原結合部分的獨特型特異性結合，由此可逆地遮蔽第二抗原結合部分，其中所述掩蔽部分是抗獨特型scFv；

iv)向腫瘤樣品添加報道細胞，其中蛋白酶切割蛋白酶可切割接頭，其中第二抗原結合部分去遮蓋，其中所述蛋白酶由腫瘤細胞表達；和

v)通過確定報道基因的表達，確定靶抗原的存在，

其中靶抗原由腫瘤細胞表達，其中報道基因表達提示第一抗原結合部分與靶抗原結合，且其中報道基因表達提示腫瘤樣品中的蛋白酶表達。

2.根據權利要求1所述的方法，其中腫瘤樣品是腫瘤組織樣品。

3.根據權利要求1所述的方法，其中腫瘤樣品是來自患者的活組織檢查樣品。

4.根據權利要求1所述的方法，其中蛋白酶表達提示惡性腫瘤。

5.根據權利要求1所述的方法，其中報道細胞包含編碼反應元件控制下的報道基因的DNA序列和編碼信號轉導性細胞表面受體的DNA序列。

6.根據權利要求1所述的方法，其中第二抗原結合部分能夠與CD3ε特異性結合。

7.根據權利要求1所述的方法，其中第一和第二抗原結合部分是包含共同輕鏈的常規Fab分子。

8.根據權利要求1至7中任一項所述的方法，其中靶抗原是細胞表面受體。

9.根據權利要求1至7中任一項所述的方法，其中靶抗原是FolR1。

10.根據權利要求1至7中任一項所述的方法，其中靶抗原是與人主要組織相容性復合體的分子結合的肽。

11.選擇用于治療腫瘤的雙特異性抗體的體外方法，其中雙特異性抗體包含：

a.能夠與靶抗原特異性結合的第一抗原結合部分；

b.能夠與信號轉導性細胞表面受體特異性結合的第二抗原結合部分；和

c.通過蛋白酶可切割接頭與第二抗原結合部分共價連接的掩蔽部分，其中掩蔽部分能夠與第二抗原結合部分的獨特型特異性結合，由此可逆地遮蔽第二抗原結合部分；

其中所述方法包括根據權利要求1至10中任一項所述的方法，確定腫瘤樣品中靶抗原的存在并且其中如果檢測到報道基因表達，則選擇雙特異性抗體用于治療腫瘤。