[發(fā)明專利]以RNA通過干細(xì)胞分化誘導(dǎo)胰臟β細(xì)胞在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201780071029.0 | 申請(qǐng)日： | 2017-11-16 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN109963938A | 公開（公告）日： | 2019-07-02 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 王繼武;倪毓輝;趙媛媛 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 美國(guó)綠陽生物技術(shù)及醫(yī)藥公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N5/071 | 分類號(hào)： | C12N5/071;A61K35/39 |
| 代理公司： | 北京律盟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11287 | 代理人： | 林斯凱 |
| 地址： | 美國(guó)加利*** | 國(guó)省代碼： | 美國(guó);US |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 胰臟β細(xì)胞 內(nèi)胚層 多能干細(xì)胞誘導(dǎo) 干細(xì)胞分化誘導(dǎo) 內(nèi)分泌細(xì)胞 胰臟 誘導(dǎo) 分化 發(fā)現(xiàn) | ||
1.一種誘導(dǎo)干細(xì)胞分化成感測(cè)葡萄糖的胰島素分泌胰臟β細(xì)胞的方法，其包含以下步驟：
(a)在分化條件下培養(yǎng)誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞作為起始細(xì)胞；
(b)誘導(dǎo)所述起始細(xì)胞脫離多能狀態(tài)朝向中內(nèi)胚層譜系；
(c)以有效劑量且在特定時(shí)間窗內(nèi)通過用mRNA的第一組合進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染來引導(dǎo)分化細(xì)胞朝向內(nèi)胚層細(xì)胞；
(d)進(jìn)一步通過用mRNA的第二組合進(jìn)行轉(zhuǎn)染來引導(dǎo)所述內(nèi)胚層細(xì)胞朝向胰臟祖細(xì)胞；
(e)進(jìn)一步用mRNA的第三組合使所述胰臟祖細(xì)胞成熟化為胰臟內(nèi)分泌細(xì)胞；和
(f)收集富含響應(yīng)于環(huán)境葡萄糖且能夠分泌胰島素作為響應(yīng)的胰臟β細(xì)胞的集群。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第一組合包含F(xiàn)oxA2 mRNA。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第一組合包含Sox17 mRNA。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第一組合包含F(xiàn)oxA2 mRNA和Sox17mRNA。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第一組合包含F(xiàn)oxA2 mRNA、Sox17mRNA、GATA4 mRNA和GATA6 mRNA。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第二組合包含PDX1 mRNA、Hlxb9mRNA、Ptf1a mRNA、ixl1 mRNA、HNF1a mRNA和HNF1b mRNA以及Sox9 mRNA中的至少一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第三組合包含PDX1 mRNA、NKX6.1mRNA、NKX2.2 mRNA、Pax6 mRNA、Pax4 mRNA、Hlxb9 mRNA和Ngn3 mRNA中的至少一種。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中影響胰臟β細(xì)胞命運(yùn)定型的所述mRNA包含NKX6.1mRNA、MAFA mRNA或MAFA mRNA中的至少一種。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述起始細(xì)胞收集自個(gè)體的體液或組織。
10.一種細(xì)胞，其通過根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法獲得。
11.一種用于治療疾病、病癥或畸形的組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求10所述的細(xì)胞。
12.一種治療疾病、病癥或畸形的方法，其包含向有需要的個(gè)體投與根據(jù)權(quán)利要求9所述的細(xì)胞和根據(jù)權(quán)利要求11所述的組合物中的至少一種的步驟。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述細(xì)胞衍生自接受者個(gè)體。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的方法，其中所述起始細(xì)胞收集自接受者。
15.一種產(chǎn)生誘導(dǎo)的感測(cè)葡萄糖的胰島素分泌胰臟β細(xì)胞的方法，其包含以下步驟：
(a)在分化條件下培養(yǎng)誘導(dǎo)的多能干細(xì)胞作為起始細(xì)胞；
(b)誘導(dǎo)所述起始細(xì)胞脫離多能狀態(tài)朝向中內(nèi)胚層譜系；
(c)以有效劑量且在特定時(shí)間窗內(nèi)通過用mRNA的第一組合進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)染來引導(dǎo)分化細(xì)胞朝向內(nèi)胚層細(xì)胞；
(d)進(jìn)一步通過用mRNA的第二組合進(jìn)行轉(zhuǎn)染來引導(dǎo)所述內(nèi)胚層細(xì)胞朝向胰臟祖細(xì)胞；
(e)進(jìn)一步用mRNA的第三組合使所述胰臟祖細(xì)胞成熟化為胰臟內(nèi)分泌細(xì)胞；和
(f)收集富含響應(yīng)于環(huán)境葡萄糖且能夠分泌胰島素作為響應(yīng)的胰臟β細(xì)胞的集群。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于美國(guó)綠陽生物技術(shù)及醫(yī)藥公司，未經(jīng)美國(guó)綠陽生物技術(shù)及醫(yī)藥公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購(gòu)買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請(qǐng)聯(lián)系【客服】
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