[發明專利]新穎的酰基轉移酶、變體硫酯酶和其用途

在審

• 申請號: 201780070707.1
• 申請日: 2017-10-05
• 公開（公告）號: CN110114456A
• 公開（公告）日: 2019-08-09
• 發明（設計）人: J·L·莫斯利;J·加索拉里;X·趙;A·俄溫;A·索曼奇;S·富蘭克林;D·戴維斯
• 申請（專利權）人: 柯碧恩生物技術公司
• 主分類號: C12N9/10
• 分類號: C12N9/10
• 代理公司: 北京市中咨律師事務所 11247
• 代理人: 陳迎春;黃革生

1.一種重組載體構建體或宿主細胞，其包含編碼具有酰基轉移酶活性的蛋白質的核酸，其中所述酰基轉移酶的氨基酸序列具有與以下各者的酰基轉移酶至少75％、80％、85％、90％、95％、98％、99％或100％的一致性：SEQ ID NO:23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、42、42、43、44、45、46、47、48、49、50、52、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195或196。

2.根據權利要求1所述的重組，其中所述蛋白質的氨基酸序列包含：

a.與表5的進化枝1的酰基轉移酶至少96.3％的一致性；

b.與表5的進化枝2的酰基轉移酶至少93.9％的一致性；

c.與表5的進化枝3的酰基轉移酶至少86.5％的一致性；或

d.與表5的進化枝4的酰基轉移酶至少78.5％的一致性。

3.根據權利要求1所述的重組載體構建體或宿主細胞，其中所述蛋白質的所述氨基酸序列包含：

a.與表5的進化枝1的酰基轉移酶至少98％的一致性；

b.與表5的進化枝2的酰基轉移酶至少98％的一致性；

c.與表5的進化枝3的酰基轉移酶至少90％的一致性；或

d.與表5的進化枝4的酰基轉移酶至少80％的一致性。

4.根據權利要求1所述的重組載體構建體或宿主細胞，其中所述蛋白質的所述氨基酸序列包含：

a.與表5的進化枝1的酰基轉移酶至少99％的一致性；

b.與表5的進化枝2的酰基轉移酶至少99％的一致性；

c.與表5的進化枝3的酰基轉移酶至少95％的一致性；或

d.與表5的進化枝4的酰基轉移酶至少85％的一致性。

5.根據權利要求1所述的重組載體構建體或宿主細胞，其中所述蛋白質的所述氨基酸序列包含：

a.與表5的進化枝3的酰基轉移酶至少98％的一致性；或

b.與表5的進化枝4的酰基轉移酶至少90％的一致性。

6.根據權利要求1所述的重組載體構建體或宿主細胞，其中所述蛋白質的所述氨基酸序列包含：

a.與表5的進化枝3的酰基轉移酶至少99％的一致性；或

b.與表5的進化枝4的酰基轉移酶至少95％的一致性。

7.根據權利要求1所述的重組載體構建體或宿主細胞，其中所述蛋白質的所述氨基酸序列包含與表5的進化枝4的酰基轉移酶至少98％或99％的一致性。

8.根據權利要求1至7中任一項所述的核酸，其中編碼所述酰基轉移酶的所述核酸經密碼子優化以用于在原壁菌屬(Prototheca)或小球藻屬(Chlorella)中表達，并且其中所述編碼序列在所述編碼序列的至少60％所述密碼子中含有表1或表2中的最優選或次最優選密碼子，使得經密碼子優化的序列在原壁菌屬或小球藻屬中比非密碼子優化的序列更有效地轉譯。

9.根據權利要求8所述的核酸，其中所述編碼序列在所述編碼序列的至少80％所述密碼子中含有表1或表2中的最優選或次最優選密碼子。

10.根據權利要求8所述的核酸，其中所述編碼序列在所述編碼序列的至少90％所述密碼子中含有表1或表2中的最優選或次最優選密碼子。