[發明專利]調節細胞表達的生物活性的結合分子

在審

• 申請號: 201780069440.4
• 申請日: 2017-09-22
• 公開（公告）號: CN109983033A
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發明（設計）人: 塞西利亞·安娜·威廉明娜·熱延;馬克·思羅斯比;科內利斯·阿德里安·德克呂夫;林塞·克洛斯特;保盧斯·約翰內斯·塔肯;敦·洛格滕伯格
• 申請（專利權）人: 美勒斯公司
• 主分類號: C07K16/46
• 分類號: C07K16/46;C07K16/28;A61P35/00;C07K16/12
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 鄭斌;劉振佳

1.一種刺激細胞上的TNF受體超家族的成員的活性的方法，所述方法包括提供第一細胞和第二細胞，其中所述第一細胞在細胞膜上具有所述成員并且所述第二細胞在細胞膜上具有第二膜蛋白，所述方法包括使所述細胞與包含兩個可變結構域的雙特異性抗體接觸，其中一個可變結構域包含能夠結合所述成員的細胞外部分的第一抗原結合位點，并且另一個可變結構域包含能夠結合所述第二膜蛋白的細胞外部分的第二抗原結合位點，從而刺激所述第一細胞上所述成員的活性。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述第二膜蛋白不為所述TNF受體超家族的成員。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中所述雙特異性抗體包含兩個抗原結合位點。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的方法，其中所述雙特異性抗體的抗原結合位點由能夠結合所述TNF受體超家族的所述成員的細胞外部分的一個免疫球蛋白可變結構域以及能夠結合所述第二膜蛋白的一個免疫球蛋白可變結構域組成。

5.根據權利要求1至4中任一項所述的方法，其中所述雙特異性抗體是全長抗體。

6.根據權利要求1至5中任一項所述的方法，其中所述雙特異性抗體是IgG。

7.根據權利要求1至6中任一項所述的方法，其中所述第一細胞不在所述細胞膜上顯著地表達所述第二膜蛋白。

8.根據權利要求1至7中任一項所述的方法，其中所述第二膜蛋白是存在于所述細胞膜上的一個或多個區中的膜蛋白。

9.根據權利要求8所述的方法，其中所述區是所述細胞膜上的簇、結構域、微結構域或隔室，優選地免疫突觸。

10.根據權利要求1至9中任一項所述的方法，其中所述第二膜蛋白作為包括所述第二膜蛋白的兩個或更多個實例的多聚體膜蛋白的一部分存在于所述細胞膜上。

11.根據權利要求1至10中任一項所述的方法，其中所述第二膜蛋白作為同源二聚體或同源三聚體的一部分存在于所述細胞膜上。

12.根據權利要求1至11中任一項所述的方法，其中所述第二膜蛋白是B7家族的成員。

13.根據權利要求12所述的方法，其中所述第二膜蛋白是PD-L1或PD-L2，優選地PD-L1。

14.根據權利要求1至13中任一項所述的方法，其中結合所述TNF受體超家族的所述成員的所述可變結構域阻斷了配體與所述成員的結合。

15.根據權利要求1至14中任一項所述的方法，其中結合所述TNF受體超家族的所述成員的細胞外部分的所述可變結構域被定義為如下可變結構域：當處于包括兩個結合所述TNF受體超家族的所述成員的所述可變結構域的二價單特異性抗體形式時，不刺激細胞上所述TNF受體超家族成員的活性。

16.根據權利要求1至15中任一項所述的方法，其還包括提供另一種雙特異性抗體，所述另一種雙特異性抗體包含能夠結合所述TNF受體超家族的所述成員的細胞外部分的抗原結合位點以及能夠結合所述第二膜蛋白的細胞外部分的抗原結合位點，其中所述第一雙特異性抗體和所述第二雙特異性抗體結合：

-所述第一膜蛋白上的不同表位；

-所述第二膜蛋白上的不同表位；或者

-所述第一膜蛋白上的不同表位以及所述第二膜蛋白上的不同表位；

所述方法還包括將所述第一細胞和所述第二細胞與所述第一雙特異性抗體和所述第二雙特異性抗體一起溫育，從而刺激所述第一細胞上所述TNF受體超家族的所述成員的活性。