[發明專利]用于檢測BK病毒的組合物和方法

有效

• 申請號: 201780069387.8
• 申請日: 2017-10-20
• 公開（公告）號: CN109983138B
• 公開（公告）日: 2023-03-31
• 發明（設計）人: R·梅塔;J·孫
• 申請（專利權）人: 豪夫邁·羅氏有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 岑曉東

1.引物組和探針制備供一種樣品中的BK病毒的多重檢測的方法使用的試劑盒的用途，該方法包括：

執行擴增步驟，其包括使該樣品與第一和第二引物組接觸以產生第一和第二擴增產物；

執行雜交步驟，其包括使該第一和第二擴增產物與第一和第二探針接觸；并且

執行檢測步驟，其檢測該第一和/或第二擴增產物是否存在，其中該第一和/或第二擴增產物存在指示該樣品中存在BK病毒，并且其中該第一和第二擴增產物不存在指示該樣品中不存在BK病毒；

其中：

該第一引物組含有由SEQ ID NO:4和5組成的兩種引物，并且，該第一探針由SEQ IDNO:3或其互補序列組成；且

該第二引物組含有由SEQ ID NO:6和7組成的兩種引物，并且，該第二探針由SEQ IDNO:8或其互補序列組成；或

該第二引物組含有由SEQ ID NO:9和10組成的兩種引物，并且，該第二探針由SEQ IDNO:11或其互補序列組成。

2.權利要求1的用途，其中該雜交步驟包括使該第一和第二擴增產物與標記有供體熒光部分和對應的受體部分的第一和第二探針接觸，其中該檢測步驟包括檢測該第一和第二探針的供體熒光部分和受體部分之間是否存在熒光共振能量轉移，并且其中熒光是否存在指示該樣品中是否存在BK病毒。

3.權利要求2的用途，其中該受體部分是淬滅物BlackHole Quencher^TM-2。

4.權利要求2的用途，其中該供體熒光部分是HEX。

5.權利要求1-4中任一項的用途，其中該方法還包括：平行檢測來自一種或多種其他微生物中的第二靶核酸。

6.權利要求5的用途，其中該一種或多種其他微生物是選自下組的病毒：甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒、西尼羅病毒、日本腦炎病毒、寨卡病毒、登革熱病毒、圣路易斯腦炎病毒和基孔肯雅病毒。

7.一種用于BK病毒核酸的多重檢測的試劑盒，其包含：第一和第二引物組；以及熒光可檢測地標記的第一和第二探針，其中該第一探針被配置成與由該第一引物組生成的第一擴增子雜交且該第二探針被配置成與由該第二引物組生成的第二擴增子雜交，

其中：

該第一引物組含有由SEQ ID NO:4和5組成的兩種引物，并且，該第一探針由SEQ IDNO:3或其互補序列組成；且

該第二引物組含有由SEQ ID NO:6和7組成的兩種引物，并且，該第二探針由SEQ IDNO:8或其互補序列組成；或

該第二引物組含有由SEQ ID NO:9和10組成的兩種引物，并且，該第二探針由SEQ IDNO:11或其互補序列組成。

8.權利要求7的試劑盒，其還包含核苷三磷酸、核酸聚合酶和核酸聚合酶功能所需的緩沖液。

9.權利要求7或8的試劑盒，其中熒光可檢測地標記的第一和第二探針包含供體熒光部分和對應的受體部分。

10.權利要求9的試劑盒，其中該受體部分是淬滅物BlackHole Quencher^TM-2，并且其中該供體熒光部分是HEX。