[發明專利]工程化亞胺還原酶和用于酮和胺化合物的還原胺化的方法

有效

• 申請號: 201780065554.1
• 申請日: 2017-08-08
• 公開（公告）號: CN109863162B
• 公開（公告）日: 2023-03-17
• 發明（設計）人: 瑪吉·塔布加·博拉-加爾斯克;奧斯卡·阿爾維左;美利莎·安·梅奧;斯蒂芬·詹納;奧里克·安東尼·索厄爾-肯士;卡梅拉·莫利納羅
• 申請（專利權）人: 科德克希思公司
• 主分類號: C07H21/00
• 分類號: C07H21/00;C07K14/435;C12N9/00;C12N9/06;C12N15/52;C12N15/53
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 李敏春;鄭霞

1.一種工程化多肽，其中所述工程化多肽的氨基酸序列與SEQ ID NO:270之間的氨基酸殘基差異為取代169N；或者取代169N、213V與以下中的1-5個的組合：123G、124A/G、171V、173H/I、175G/H、212C/G/V和235K；或者取代169N、213T與以下中的1-3個的組合：123G、173I和212G；并且其中所述工程化多肽具有亞胺或肟還原酶活性。

2.根據權利要求1所述的工程化多肽，其中所述工程化多肽的氨基酸序列與SEQ IDNO:270之間的氨基酸殘基差異為取代169N、213V、235K與以下中的1-4個的組合：123G、124G、171V、173H/I、175G/H和212C/G/V。

3.一種工程化多肽，其中所述工程化多肽的氨基酸序列在SEQ ID NO:76、78、80、84、86、88、94、98、100、110、112、114、120、124、126、128、130、134、136、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、164、166、168、170、176、178、180、182、188、190、192、194、204、206、208、210、214、216、222、224、226、228、230或232中列出。

4.一種工程化多肽，其中所述工程化多肽的氨基酸序列在SEQ ID NO:234至SEQ IDNO:268中的任何偶數序列中列出。

5.一種工程化多核苷酸，所述工程化多核苷酸編碼至少一種權利要求1-4中任一項所述的工程化多肽。

6.根據權利要求5所述的工程化多核苷酸，其中所述工程化多核苷酸的序列在SEQ IDNO: 75、77、79、83、85、87、93、97、99、109、111、113、119、123、125、127、129、133、135、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、163、165、167、169、175、177、179、181、187、189、191、193、203、205、207、209、213、215、221、223、225、227、229、231中列出，或在SEQ ID NO:233至SEQ ID NO:267中的奇數序列中列出。

7.一種載體，所述載體包含權利要求5或6所述的工程化多核苷酸。

8.根據權利要求7所述的載體，還包含至少一個控制序列。

9.一種宿主細胞，所述宿主細胞包含權利要求7或權利要求8所述的載體。

10.根據權利要求9所述的宿主細胞，其中所述宿主細胞產生至少一種權利要求1-4中任一項所述的工程化多肽。

11.一種產生工程化亞胺或肟還原酶多肽的方法，所述方法包括培養權利要求9或10所述的宿主細胞的步驟，所述步驟在使得所述工程化多核苷酸被表達和所述工程化多肽被產生的條件下進行。

12.根據權利要求11所述的方法，還包括回收所述工程化多肽的步驟。