[發(fā)明專利]腎素濃度的免疫學(xué)測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201780064946.6
• 申請(qǐng)日: 2017-10-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110114676B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-03-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 佐久拓彌;濱野久美子;原隆二郎
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 富士瑞必歐株式會(huì)社
• 主分類號(hào): G01N33/53
• 分類號(hào): G01N33/53;C07K16/40
• 代理公司: 北京匯思誠(chéng)業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11444
• 代理人: 龔敏;王剛

本發(fā)明已成功取得一種與非活性型腎素相比，對(duì)活性型腎素顯示更高的反應(yīng)性的抗體。本發(fā)明成功開(kāi)發(fā)出一種通過(guò)使用該抗體，即使在腎素抑制劑的存在下，測(cè)定值仍與腎素活性顯示強(qiáng)相關(guān)性的免疫學(xué)測(cè)定方法。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明是有關(guān)于一種對(duì)活性型腎素顯示特異性的抗體、利用該抗體的腎素濃度的免疫學(xué)測(cè)定方法、包含該抗體的藥劑、及包含該藥劑的試劑盒。

背景技術(shù)

腎素是一種經(jīng)由腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)來(lái)進(jìn)行血壓調(diào)節(jié)的蛋白質(zhì)，其活性在高血壓或原發(fā)性醛固酮增多癥等的診斷中為重要的指標(biāo)。

因此，用來(lái)測(cè)定腎素活性或腎素濃度的方法的開(kāi)發(fā)持續(xù)進(jìn)行，目前在日本，檢測(cè)利用血漿中的腎素使血管緊張素原分解所生成的血管緊張素-I的腎素活性測(cè)定方法已成主流(非專利文獻(xiàn)1)。然而，此方法有腎素活性需取決于血漿中的血管緊張素原的濃度的問(wèn)題。

另一方面，作為不受血管緊張素原濃度的影響的方法，亦有人利用檢測(cè)活性型腎素的方法。活性型的成熟腎素是由腎素原(prorenin)所生成；而腎素原存在有封閉結(jié)構(gòu)(日語(yǔ)：クローズ構(gòu)造)與開(kāi)放結(jié)構(gòu)(日語(yǔ)：オープン構(gòu)造)此2種方式，其中開(kāi)放結(jié)構(gòu)為活性型。因此，在活性型腎素的測(cè)定中，亦有人開(kāi)發(fā)出能以免疫學(xué)方式測(cè)定成熟腎素與開(kāi)放結(jié)構(gòu)腎素原此兩者的方法(非專利文獻(xiàn)1)。

然而，此等使用于免疫學(xué)手法的抗體，甚而連因與腎素抑制劑結(jié)合而呈非活性化的成熟腎素或腎素原皆可識(shí)別(非專利文獻(xiàn)2、3)，因此，在測(cè)定給藥腎素抑制劑的患者的活性型腎素時(shí)，有測(cè)得的腎素濃度與腎素活性不顯示相關(guān)性的問(wèn)題。

[現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)]

[非專利文獻(xiàn)]

[非專利文獻(xiàn)1]Campbell DJ et al.Clin Chem.2009May；55(5):867-77

[非專利文獻(xiàn)2]Campbell DJ.Hypertension.2008Jan；51(1):15-8

[非專利文獻(xiàn)3]Derkx FH.Clin Chem.1996Jul；42(7):1051-63

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題

本發(fā)明鑒于此種情況而完成，其目的在于提供一種方法，其為以免疫學(xué)方式測(cè)定腎素濃度的方法，即使在腎素抑制劑的存在下，測(cè)得的腎素濃度仍與腎素活性顯示相關(guān)性。又，本發(fā)明亦以提供一種用于該測(cè)定的活性型腎素特異性抗體、包含該活性型腎素特異性抗體的藥劑、及包含該藥劑的試劑盒為目的。

用于解決問(wèn)題的技術(shù)方案

本案發(fā)明人等為解決前述課題，而建構(gòu)出以免疫學(xué)方式測(cè)定腎素抑制劑存在下的腎素濃度的系統(tǒng)，并針對(duì)選出的抗體，利用該系統(tǒng)來(lái)評(píng)定添加腎素抑制劑時(shí)的腎素濃度的測(cè)定值與腎素活性的關(guān)系。其結(jié)果，終于由所評(píng)定的多個(gè)抗體中成功鑒定出在腎素抑制劑存在下測(cè)定出的腎素濃度與腎素活性極相關(guān)的多個(gè)抗體。

所鑒定的抗體不僅在添加腎素抑制劑之一的阿利吉侖(Aliskiren)時(shí)，在添加其他的腎素抑制劑-腎素抑制劑III或VTP-27999時(shí)，測(cè)得的腎素濃度亦與腎素活性顯示強(qiáng)相關(guān)性。此事實(shí)意味著：取得的抗體對(duì)未與腎素抑制劑結(jié)合而具有活性的腎素顯示高反應(yīng)性，另一方面對(duì)結(jié)合腎素抑制劑而呈非活性的腎素的反應(yīng)性大幅降低。又，顯示此種反應(yīng)性的抗體可識(shí)別腎素上的共同的表位。

另外，就市售的抗體，如以往報(bào)導(dǎo)所述，對(duì)結(jié)合腎素抑制劑而呈非活性的腎素亦顯示高反應(yīng)性，而完全未看出測(cè)得的腎素濃度與腎素活性的相關(guān)性。

如此，本申請(qǐng)的發(fā)明人等于世界上首次成功開(kāi)發(fā)出一種無(wú)論有無(wú)腎素抑制劑存在，對(duì)活性型腎素皆顯示特異反應(yīng)性的抗體，并成功利用該抗體，建構(gòu)出測(cè)得的腎素濃度與腎素活性顯示強(qiáng)相關(guān)性的免疫學(xué)測(cè)定方法，終至完成本發(fā)明。