[發明專利]免疫學測定方法和測定試劑

有效

• 申請號: 201780057194.0
• 申請日: 2017-10-17
• 公開（公告）號: CN109716132B
• 公開（公告）日: 2022-03-01
• 發明（設計）人: 村上裕輔
• 申請（專利權）人: 榮研化學株式會社
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/545
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262
• 代理人: 李敏春;鄭霞

本發明的目的在于提供一種免疫學測定方法和使用該方法的免疫學測定試劑，所述免疫學測定方法即使在測定的試樣中含有高濃度的異嗜性抗體和類風濕因子等干擾物質的情況下，也能夠長期充分地抑制由這些干擾物質引起的干擾作用，并且不受血紅蛋白的影響。具體而言，本發明涉及一種免疫學測定試劑，其特征在于，在含有亞硫酸鹽的免疫學測定試劑中，pH值為7.4以下，還含有抗壞血酸或其鹽、硫醇化合物等還原性物質。

技術領域

本發明涉及一種免疫學測定方法，以及免疫學測定試劑，所述免疫學測定方法在被測定物質的免疫學方法的測定中，能夠抑制異嗜性抗體和類風濕因子等干擾物質(以下稱作干擾物質)的干擾作用，并準確測定抗原或抗體濃度。

背景技術

利用抗原和抗體間的抗原抗體反應的免疫學測定方法，可以簡便而迅速地測定生物體中的蛋白質等免疫活性物質，因此近年來被廣泛用于各種疾病的診斷。作為這種免疫學測定方法，有放射免疫測定法(RIA)、酶免疫測定法(EIA)、熒光免疫測定法(FIA)、免疫比濁法(TIA)、乳膠凝集法(LA)、免疫層析法等各種方法，它們已得到實用化。

但是，在作為免疫學測定方法的測定對象的樣本中，有時會含有對抗原抗體反應產生干擾的干擾物質等。當這些抗原抗體反應中含有干擾物質時，會對測定產生影響，故無法準確測定；尤其在臨床檢查領域，將無法進行準確的診斷，因此，到目前為止已提出有減輕或抑制干擾物質影響的方法。

例如，為了解決混雜有類風濕因子而導致的干擾作用的問題，已提出有預先用與類風濕因子的結合位點結合的動物來源抗體對樣本進行預處理，以降低類風濕因子干擾作用的免疫學測定方法(專利文獻1)，以及通過將反應液的pH值保持在4.0～6.0來抑制類風濕因子干擾作用的免疫學測定方法(專利文獻2)等。

另外，為了減輕或抑制干擾物質的干擾作用，已提出有使用通過酶反應除去了用于免疫學測定的抗體的Fc部分的F(ab’)₂的方法(專利文獻3)。但是，這種免疫學測定方法只能在測定抗原時使用，而且需要酶反應和純化等復雜步驟來制作F(ab’)₂，存在成本上升和生產批次間差異的問題。

另外，還有人提出了利用聚合或凝集的抗體分子來抑制異嗜性抗體的干擾作用的方法(專利文獻4)，但是，完全抑制異嗜性抗體的干擾作用需要大量的聚合或凝集的抗體分子，存在成本上升的問題。

這些文獻記載的抑制干擾物質的干擾作用的方法雖然可以確實改善干擾物質的影響，但如果在待測定的試樣中含有高濃度的干擾物質，則其干擾作用的抑制效果會不足。

已提出有利用亞硫酸鹽的方法，該方法即使在待測定的試樣中含有高濃度的干擾物質，也能抑制干擾物質的干擾作用(專利文獻5)。亞硫酸鹽具有以下優點：價格非常低廉，即使以能夠充分抑制高濃度干擾物質的影響的濃度使用，也不會增加成本，而且不易影響到抗原抗體反應。

但是，由于亞硫酸鹽會被測定試劑中的溶解氧或空氣中的氧氣逐漸氧化為硫酸鹽，因此它對干擾物質的干擾作用的抑制效果會隨時間推移而下降。即存在以下問題：為了在自動分析裝置等中使用，亞硫酸鹽的濃度會因在開封狀態下保存在試劑庫等中而隨時間推移地減少，從而無法充分抑制干擾物質的影響。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：日本特開平7-012818號公報

專利文獻2：日本特開平8-146000號公報

專利文獻3：日本特開昭54-119292號公報

專利文獻4：日本特開平4-221762號公報

專利文獻5：日本特開2001-074739號公報

發明內容

發明所要解決的問題