[發明專利]通過烷醇的酶促脫水形成烯烴

有效

• 申請號: 201780055991.5
• 申請日: 2017-07-12
• 公開（公告）號: CN109996865B
• 公開（公告）日: 2023-02-03
• 發明（設計）人: M.S.羅佩斯;D.J.科赫;I.E.古維;D.N.奧卡莫托;V.L.凱羅斯
• 申請（專利權）人: 布拉斯肯有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P1/00;C12P5/02;C12P7/54;C12P19/24
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 初明明;黃登高

1.一種重組微生物，所述重組微生物能夠從一種或多種飽和的伯醇或仲醇生產一種或多種伯烯，各伯烯具有結構B所示的結構，各伯醇或仲醇具有結構A所示的結構，

其中R₁ = C_nH_2n+1，1≤n≤11；R₂ = C_mH_2m+1，0≤m≤10，和n+m≤11；并且其中所述重組微生物表達編碼一種或多種芳樟醇脫水酶/異構酶的一種或多種外源性核酸分子，所述芳樟醇脫水酶/異構酶催化所述一種或多種飽和的伯醇或仲醇轉化為一種或多種相應的伯烯，所述芳樟醇脫水酶/異構酶包含選自SEQ ID NO: 2、5和26的氨基酸序列，

其中所述重組微生物還表達編碼一種或多種酶的一種或多種外源性核酸分子，所述一種或多種酶用于從可再生原料生產一種或多種飽和的伯醇或仲醇，和

其中所述可再生原料是一種或多種糖。

2.根據權利要求1所述的重組微生物，其中所述重組微生物能夠生產異丙醇，和其中所述重組微生物表達：

（a）編碼催化乙酰-CoA轉化為乙酰乙酰-CoA的硫解酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（b）編碼催化獲自（a）的乙酰乙酰-CoA轉化為乙酰乙酸的乙酸:乙酰乙酰-CoA轉移酶或水解酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（c）編碼催化獲自（b）的乙酰乙酸轉化為丙酮的乙酰乙酸脫羧酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；和

（d）編碼催化獲自（c）的丙酮轉化為異丙醇的仲醇脫氫酶的至少一種內源性或外源性核酸分子。

3.根據權利要求1所述的重組微生物，其中所述重組微生物能夠從外源性D-木糖共生產一乙二醇（MEG）和異丙醇，和其中所述重組微生物表達選自以下的至少一種酶：D-塔格糖3-差向異構酶、D核酮糖激酶、D-核酮糖-1-磷酸醛縮酶、乙醇醛還原酶、硫解酶、乙酸:乙酰乙酰-CoA轉移酶、乙酰乙酸脫羧酶、D-木酮糖1-激酶、D-木酮糖-1-磷酸醛縮酶、D-木糖異構酶、木糖還原酶、木糖醇脫氫酶、木糖脫氫酶、木糖酸內酯酶、木糖酸脫水酶、2-酮-3-脫氧-D-戊糖酸醛縮酶和仲醇脫氫酶。

4.根據權利要求1-3任一項所述的重組微生物，其中所述重組微生物能夠從外源性D-木糖和葡萄糖共生產一乙二醇（MEG）和異丙醇。

5.根據權利要求1-3任一項所述的重組微生物，其中所述重組微生物能夠共生產正丙醇和異丙醇，其中所述重組微生物表達以下的一種或多種：

（a）編碼催化二羥基丙酮磷酸（DHAP）轉化為丙酮醛的丙酮醛合酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（b）編碼催化獲自（a）的丙酮醛轉化為丙酮醇的醛-酮還原酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（c）編碼催化獲自（a）的丙酮醛轉化為乳醛的乙醛酸還原酶、丙酮醛脫氫酶或醛脫氫酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（d）編碼催化獲自（b）的丙酮醇轉化為1,2-丙二醇的醛-酮還原酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（e）編碼催化獲自（c）的乳醛轉化為1,2-丙二醇的醛還原酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（f）編碼催化獲自（d）或（e）的1,2-丙二醇轉化為丙醛的二醇脫水酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（g）編碼催化獲自（f）的丙醛轉化為正丙醇的脫氫酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（h）編碼催化丙酮酸轉化為乙酰-CoA的丙酮酸甲酸裂解酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（i）編碼催化獲自（h）的乙酰-CoA轉化為乙酰乙酰-CoA的硫解酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（j）編碼催化獲自（i）的乙酰乙酰-CoA轉化為乙酰乙酸的乙酸:乙酰乙酰-CoA轉移酶或水解酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

（k）編碼催化獲自（j）的乙酰乙酸轉化為丙酮的乙酰乙酸脫羧酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；和/或

（l）編碼催化獲自（k）的丙酮轉化為異丙醇的仲醇脫氫酶的至少一種內源性或外源性核酸分子；

和其中DHAP和丙酮酸在所述微生物中由糖酵解產生。