[發(fā)明專利]包含金屬結(jié)合基序的IgG結(jié)合多肽的靶-結(jié)合多肽突變體有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201780055034.2 | 申請日： | 2017-09-05 |
| 公開（公告）號： | CN109715652B | 公開（公告）日： | 2023-06-20 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | S.霍伯;S.坎耶;J.尼爾維蘭 | 申請（專利權(quán)）人： | 思拓凡生物工藝研發(fā)有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/31 | 分類號： | C07K14/31;C12N15/62;C07K1/22 |
| 代理公司： | 中國專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 初明明;黃希貴 |
| 地址： | 瑞典烏*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 包含 金屬 結(jié)合 igg 多肽 突變體 | ||
1.IgG-結(jié)合多肽的靶-結(jié)合多肽突變體，其包含金屬結(jié)合基序，其中靶結(jié)合在金屬離子的存在下發(fā)生，其中所述多肽突變體是從葡萄球菌蛋白A?(SpA)結(jié)構(gòu)域B衍生的結(jié)構(gòu)域Z的Fc-結(jié)合突變體，其中金屬結(jié)合基序插入在結(jié)構(gòu)域Z的螺旋2和3之間，其中金屬結(jié)合基序是鈣結(jié)合的，和靶結(jié)合是在鈣離子的存在下進(jìn)行的，并且其中所述多肽突變體選自SEQ?ID?NO1-9。
2.依據(jù)權(quán)利要求1的多肽突變體，其包含在金屬結(jié)合基序序列之前的接頭。
3.一種配體，其包含依據(jù)權(quán)利要求1-2中任一項的多肽突變體。
4.依據(jù)權(quán)利要求3的配體，其包含SEQ?ID?NO?8所示的多肽突變體。
5.依據(jù)權(quán)利要求3或4的配體的多肽的多聚體，其選自二聚體、三聚體、四聚體、五聚體或六聚體。
6.依據(jù)權(quán)利要求3或4的配體的多肽的多聚體，其是四聚體。
7.一種色譜基質(zhì)，其包含與其偶聯(lián)的依據(jù)權(quán)利要求3或4的配體或依據(jù)權(quán)利要求5或6的其多聚體。
8.一種純化樣品蛋白的方法，其包括在金屬離子的存在下，將靶或樣品蛋白結(jié)合至依據(jù)權(quán)利要求3-6中任一項的配體或多聚體配體；并通過加入金屬結(jié)合分子洗脫結(jié)合的蛋白，其中所述靶或樣品蛋白是IgG或Fc-融合蛋白，并且其中所述金屬離子是鈣離子。
9.依據(jù)權(quán)利要求8的方法，其中所述多聚體配體是四聚體。
10.依據(jù)權(quán)利要求8或9的方法，其中所述配體或多聚體配體被固定到固相。
11.依據(jù)權(quán)利要求8或9的方法，其中結(jié)合的蛋白在4.5以上的pH下被洗脫。
12.依據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中結(jié)合的蛋白在pH?5-7下被洗脫。
13.依據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中結(jié)合的蛋白在pH?5.4-5.6下被洗脫。
14.依據(jù)權(quán)利要求8或9的方法，其中用金屬結(jié)合分子的洗脫是用螯合劑。
15.編碼選自SEQ?ID?NO?1-9的多肽的核酸。
16.一種表達(dá)載體，其包含權(quán)利要求15的核酸。
17.依據(jù)權(quán)利要求1-2中任一項的IgG-結(jié)合多肽的靶-結(jié)合多肽突變體和/或其多聚體作為用于色譜的固定化配體的用途。
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