[發明專利]三聚體穩定性HIV包膜蛋白突變

在審

• 申請號: 201780054555.6
• 申請日: 2017-09-14
• 公開（公告）號: CN109689091A
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發明（設計）人: L·呂滕;D·特魯安;N·M·斯特羅卡佩;J·P·M·朗格戴克
• 申請（專利權）人: 揚森疫苗與預防公司
• 主分類號: A61K39/12
• 分類號: A61K39/12;C07K14/005
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 王健;林曉紅

1.一種重組人類免疫缺陷病毒(HIV)包膜(Env)蛋白，其包含以下氨基酸殘基中的兩個或更多個：

(i)位置651處的Phe、Leu、Met、或Trp，優選Phe；

(ii)位置655處的Phe、Ile、Met、或Trp，優選Ile；

(iii)位置535處的Asn或Gln，優選Asn；

(iv)位置589處的Val、Ile或Ala，優選Val；

(v)位置573處的Phe或Trp，優選Phe；

(vi)位置204處的Ile；和/或

(vii)位置647處的Phe、Met、或Ile，優選Phe,

其中這些位置的編號是根據HIV-1分離株HXB2的gp160中的編號。

2.一種重組HIV Env蛋白，該重組HIV Env蛋白包含以下氨基酸殘基中的一個或多個：

(i)位置651處的Phe、Leu、Met、或Trp，優選Phe；

(ii)位置655處的Phe、Ile、Met、或Trp，優選Ile；

(iii)位置535處的Asn或Gln，優選Asn；

(iv)位置589處的Val、Ile或Ala，優選Val；

(v)位置573處的Phe或Trp，優選Phe；

(vi)位置204處的Ile；和/或

(vii)位置647處的Phe、Met、或Ile，優選Phe,

其中該HIV Env蛋白選自下組，該組由以下各項組成：

(1)HIV Env共有序列，例如來自比如包含SEQ ID NO:2或3的氨基酸序列的進化枝C，或例如來自比如包含SEQ ID NO:4或5的氨基酸序列的進化枝B；

(2)合成HIV Env蛋白，例如包含(a)：SEQ ID NO:6的氨基酸序列；或(b)：在位置166處Glu突變為Arg的SEQ ID NO:6；或(c)：在位置501和605處的氨基酸突變為Cys殘基且位置559處的氨基酸突變為Pro殘基的(a)或(b)；或(d)：具有另外的弗林蛋白酶切割位點突變的(a)、(b)或(c)，例如由RRRRRR(SEQ ID NO:10)替換位置508-511處的氨基酸；或(e)SEQ IDNO:7；或(f)SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:9；以及

(3)親本HIV Env蛋白，優選為野生型HIV Env蛋白，優選為進化枝C的，包含以至少1000個、優選至少10000個野生型HIV Env序列的集合中小于7.5％、優選小于2％的HIV Env序列的頻率存在于對應位置的氨基酸殘基處的至少一個修復突變，其中該修復突變是以在所述集合中至少10％的HIV Env序列的頻率由存在于對應位置的氨基酸殘基進行的取代，并且優選地，該修復突變是由存在于所述集合中最常見的對應位置處的氨基酸殘基進行的取代；

并且

其中這些位置的編號是根據HIV-1分離株HXB2的gp160中的編號。

3.一種重組HIV Env蛋白，該重組HIV Env蛋白包含以下氨基酸殘基中的一個或多個：

(i)位置651處的Phe、Leu、Met、或Trp，優選Phe；

(ii)位置655處的Phe、Ile、Met、或Trp，優選Ile；

(iii)位置535處的Asn或Gln，優選Asn；

(iv)位置589處的Val、Ile或Ala，優選Val；

(v)位置573處的Phe或Trp，優選Phe；

(vi)位置204處的Ile；和/或

(vii)位置647處的Phe、Met、或Ile，優選Phe,

其中該HIV Env蛋白是包含以下中至少一個的HIV Env蛋白：

(a)位置501和605處的Cys；

(b)位置559處的Pro；

(c)位置501和605處的Cys和位置559處的Pro；以及

這些位置的編號是根據HIV-1分離株HXB2的gp160中的編號。

4.如權利要求2或3所述的重組HIV Env蛋白，該重組HIV Env蛋白包含(i)至(vii)中所指示的氨基酸殘基中的兩個或更多個。