[發明專利]用于測定轉染的裝置和方法

在審

• 申請號: 201780053749.4
• 申請日: 2017-07-04
• 公開（公告）號: CN109690294A
• 公開（公告）日: 2019-04-26
• 發明（設計）人: K·許策;R·許策
• 申請（專利權）人: 塞爾圖股份有限公司
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;G01N33/483;G01N21/64;A61K48/00;C12N15/87
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 江側燕

1.一種用于測定細胞或細胞組的轉染的體外方法，其中所述測定通過光譜進行。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述測定包括借助拉曼光譜法記錄所述細胞或細胞組的至少一個拉曼光譜。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其中在約5分鐘至約60分鐘的時間段內測定所述轉染。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的方法，其中所述細胞組是一組約60至約500個細胞。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的方法，其中所述細胞來自相同來源和/或是相同的類型。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的方法，其中所述細胞是上皮細胞、成纖維細胞、干細胞、神經元細胞、血細胞、癌細胞、皮膚細胞、心臟細胞，優選色素上皮細胞或iPS細胞的前體。

7.根據權利要求1-6中任一項所述的方法，其中所述測定包括借助集成的拉曼顯微鏡-光譜系統記錄所述細胞或細胞組的至少一個拉曼光譜。

8.根據權利要求7所述的方法，額外地包括所述細胞或細胞組的形態測定和/或在細胞之間或所述細胞組內的形態比較的步驟。

9.根據權利要求8所述的方法，其中轉染的所述測定是在所述細胞的亞單位處通過記錄至少一個拉曼光譜進行。

10.根據權利要求9所述的方法，其中所述細胞的亞單位是細胞核、細胞質、細胞膜區域、線粒體、空泡結構或微管組織中心(MTC)。

11.根據權利要求7-10中任一項所述的方法，額外地包括熒光表征所述細胞或細胞組和/或在細胞之間或所述細胞組內對比的步驟。

12.根據權利要求7-11中任一項所述的方法，額外地包括在顯微視野下用虛擬標簽標記感興趣的細胞以允許可視跟蹤。

13.根據權利要求2-12中任一項所述的方法，其中所述方法包括對至少一個拉曼光譜進行統計評估。

14.根據權利要求13所述的方法，其中所述方法包括主成分分析和/或聚類分析，其中使用預定閾值以區分轉染的和未轉染的細胞。

15.根據權利要求2-14中任一項所述的方法，其中借助評估拉曼光譜來鑒定細胞或細胞組的轉染。

16.根據權利要求15所述的方法，其中評估拉曼光譜包括拉曼光譜的光譜分析。

17.根據權利要求15或16所述的方法，其中定量測定所述細胞組的哪個比例的細胞進行了轉染。

18.根據權利要求17所述的方法，其中為了定量測定所述細胞組的哪個比例的細胞進行了轉染，對多個記錄的拉曼光譜分別進行統計分析，例如主成分分析。

19.根據權利要求2-18中任一項所述的方法，其中評估拉曼光譜包括在光阱中收集并捕獲一個細胞，以記錄拉曼光譜。

20.根據權利要求19所述的方法，其中所述光阱借助拉曼光譜系統的激發光束產生。

21.根據權利要求1或20任一項所述的方法，其中待測定的所述細胞或細胞組位于微流體系統或微流體通道中。

22.根據權利要求1-21中任一項所述的方法，其中轉染的所述測定基于計算機進行，以便自動或半自動地測定轉染。