[發(fā)明專利]用于檢測(cè)和定量代謝物的質(zhì)譜方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201780047345.4
• 申請(qǐng)日: 2017-05-26
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109564207B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: L·福特;Q·張;K·P·亞當(dāng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 梅塔博隆股份有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N33/483
• 分類(lèi)號(hào): G01N33/483;G01N33/487;G01N33/49;G01N33/50;G01N33/52
• 代理公司: 中國(guó)貿(mào)促會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 11038
• 代理人: 張小勇

本發(fā)明描述了通過(guò)質(zhì)譜測(cè)定樣品中一種或多種分析物的量的方法。一種或多種分析物選自α?羥基丁酸(2?HB)、亞油酰基LPC(LGPC)、油酸、3?羥基丁酸(3?HB)、4?甲基?2?氧代戊酸(4?MOP)、泛酸和絲氨酸。該方法包括a)在適于從一種或多種分析物中的每一種產(chǎn)生可通過(guò)質(zhì)譜檢測(cè)的一種或多種離子的條件下使樣品經(jīng)受離子化源，其中分析物在離子化之前未經(jīng)衍生化；b)通過(guò)串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)量來(lái)自一種或多種分析物中的每一種的一種或多種離子的量；c)使用測(cè)量的一種或多種離子的量來(lái)確定樣品中一種或多種分析物中的每一種的量。

相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用

本申請(qǐng)要求2016年6月2日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?2/344,613的權(quán)益，其全部?jī)?nèi)容通過(guò)引用并入本文。

背景

提供描述本發(fā)明的背景的以下信息以幫助理解本發(fā)明，并且不承認(rèn)其構(gòu)成或描述本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)。

前驅(qū)糖尿病與肥胖和高熱量飲食有關(guān)。前驅(qū)糖尿病可能會(huì)發(fā)展為2型糖尿病，但如果早期發(fā)現(xiàn)，能夠通過(guò)改變生活方式和適當(dāng)?shù)臓I(yíng)養(yǎng)管理來(lái)延遲或防止進(jìn)展。因此，前驅(qū)糖尿病的早期診斷和監(jiān)測(cè)對(duì)于減少2型糖尿病的流行至關(guān)重要。臨床上使用一種或多種基于血糖的標(biāo)準(zhǔn)(包括空腹血糖(FPG)、血紅蛋白A1c和來(lái)自口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)的2小時(shí)血漿葡萄糖測(cè)量的水平)來(lái)定義前驅(qū)糖尿病。然而，這些標(biāo)準(zhǔn)僅鑒別部分重疊的受試者組，并且可能反映導(dǎo)致2型糖尿病的不同病理生理狀態(tài)。基于代謝物的測(cè)試可用于幫助診斷和評(píng)估與前驅(qū)糖尿病和2型糖尿病相關(guān)的代謝紊亂，包括測(cè)定胰島素抵抗(IR)和糖耐量減低(IGT)。為了更準(zhǔn)確和更早地診斷前驅(qū)糖尿病狀態(tài)諸如胰島素抵抗(IR)和糖耐量減低(IGT)，已經(jīng)鑒定了新的代謝物生物標(biāo)志物。具體地，在基于血液的樣品中(例如在血漿或血清中)測(cè)量的七種代謝物生物標(biāo)志物(2-羥基丁酸(2-HB)、3-羥基丁酸(3-HB)、4-甲基-2-氧代戊酸(4-MOP)，1-亞油酰基-2-羥基-sn-甘油-3-磷酸膽堿(LGPC)、油酸、泛酸(Pantothenate)和絲氨酸)已被證明是用于血糖代謝障礙和前驅(qū)糖尿病的有用生物標(biāo)志物。一種或多種代謝物生物標(biāo)志物的量可對(duì)診斷和監(jiān)測(cè)前驅(qū)糖尿病以及將受試者分類(lèi)為具有糖耐量減低(IGT)和/或胰島素抵抗(IR)提供信息。使用在基于血液的樣品中測(cè)量的糖尿病前期生物標(biāo)志物的量，可將個(gè)體診斷為患有前驅(qū)糖尿病或與前驅(qū)糖尿病相關(guān)的疾病。另外，可以通過(guò)跟蹤前驅(qū)糖尿病生物標(biāo)志物的測(cè)量水平來(lái)監(jiān)測(cè)患有前驅(qū)糖尿病或前驅(qū)糖尿病相關(guān)病癥的個(gè)體。

本文描述了用于檢測(cè)和定量生物樣品中多達(dá)七種分析物的方法。該七種分析物可包括2-羥基丁酸(2-HB)、3-羥基丁酸(3-HB)、4-甲基-2-氧代戊酸(4-MOP)，1-亞油酰基-2-羥基-sn-甘油-3-磷酸膽堿(LGPC)、油酸、泛酸和絲氨酸。有利地，代謝物測(cè)定需要小的樣品大小并且能夠使用質(zhì)譜分析方法進(jìn)行。該方法可用于篩選和鑒定可能患有前驅(qū)糖尿病但可能是無(wú)癥狀的和/或具有正常的FPG和血紅蛋白A1c結(jié)果的患者。

本文描述的用于定量分析物的方法比現(xiàn)有方法更有效。使用現(xiàn)有方法，需要至少兩次單獨(dú)的注射來(lái)測(cè)量所有七種分析物。每次注射的運(yùn)行時(shí)間超過(guò)兩分鐘。此外，如果在同一儀器上依次進(jìn)行注射，則測(cè)量更多分析物需要額外的儀器和/或額外的運(yùn)行時(shí)間。本文所述的方法允許在單次樣品注射中測(cè)量?jī)煞N或更多種、三種或更多種、四種或更多種、五種或更多種、六種或更多種或七種分析物(理解為在單個(gè)儀器上進(jìn)行單次注射)并且總運(yùn)行時(shí)間少于4分鐘。

概述

在本發(fā)明的第一方面，方法包括通過(guò)質(zhì)譜檢測(cè)和測(cè)定樣品中選自2-羥基丁酸(2-HB)、3-羥基丁酸(3-HB)、4-甲基-2-氧代戊酸(4-MOP)、1-亞油酰基-2-羥基-sn-甘油-3-磷酸膽堿(LGPC)、油酸、泛酸和絲氨酸的一種或多種分析物的量。在檢測(cè)多種分析物的量的方法中，在單次樣品注射中檢測(cè)多種分析物的量。還提供了從生物樣品中提取分析物并在通過(guò)質(zhì)譜檢測(cè)之前色譜分離分析物的方法。