[發明專利]細胞的制備方法、細胞培養裝置和試劑盒

有效

• 申請號: 201780045585.0
• 申請日: 2017-07-25
• 公開（公告）號: CN109477055B
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發明（設計）人: 萩原昌彥;大矢修生
• 申請（專利權）人: 宇部興產株式會社
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;B29C41/12;B32B3/12;B32B5/32;B32B27/34;C08J9/28;C12M3/00;C12M3/04;C12N1/00;C12N5/00;C12N5/04;C12N5/07;C12N5/10
• 代理公司: 北京林達劉知識產權代理事務所(普通合伙) 11277
• 代理人: 劉新宇

1.細胞的制備方法，其包括將細胞應用于聚酰亞胺多孔質膜來進行培養的工序，

其中，所述聚酰亞胺多孔質膜是包括具有多個孔的表面層A和表面層B、及夾在所述表面層A和表面層B之間的大孔層的三層結構的聚酰亞胺多孔質膜，

其中，所述表面層A中存在的孔的平均孔徑小于所述表面層B中存在的孔的平均孔徑，

所述大孔層具有與所述表面層A和B結合的隔壁、以及被該隔壁及所述表面層A和B包圍的多個大孔，

所述表面層A和B中的孔與所述大孔連通，而且

大孔層中的至少1個隔壁具有連通大孔彼此的1個或多個孔，

所述聚酰亞胺多孔質膜通過包括以下工序的方法制造：

(1)將包含由四羧酸單元和二胺單元形成的極限粘度數為1.0～3.0的聚酰胺酸3～60質量％和有機極性溶劑40～97質量％的聚酰胺酸溶液流延成膜狀，浸漬或接觸在以水為必須成分的凝固溶劑中，制作聚酰胺酸的多孔質膜的工序，和

(2)對所述工序(1)得到的聚酰胺酸的多孔質膜進行熱處理而酰亞胺化的工序，其中，將熱處理后的膜的縱向和橫向的收縮率分別控制在8％以下，且在所述熱處理中，200℃以上的溫度區域的升溫速度為25℃/分鐘以上。

2.權利要求1所述的細胞的制備方法，其中，所述聚酰亞胺多孔質膜通過包括以下工序的方法制造：

(1)將含有聚酰胺酸和有機極性溶劑的聚酰胺酸溶液流延成膜狀，浸漬或接觸在凝固溶劑中，制作聚酰胺酸的多孔質膜的工序，

(2)對所述工序(1)得到的聚酰胺酸的多孔質膜進行熱處理而酰亞胺化的工序，和

(3)對所述工序(2)得到的聚酰亞胺多孔質膜的至少單面實施等離子體處理的工序。

3.權利要求1或2所述的細胞的制備方法，其中，所述聚酰胺酸由選自聯苯四羧酸二酐和均苯四甲酸二酐中的至少1種四羧酸二酐和選自苯二胺、二氨基二苯基醚和雙(氨基苯氧基)苯中的至少1種二胺獲得。

4.權利要求1或2所述的方法，其包括將細胞接種在所述聚酰亞胺多孔質膜的表面的工序。

5.權利要求1或2所述的方法，其包括以下工序：

在所述聚酰亞胺多孔質膜的干燥的表面上載置細胞懸浮液，

使所述聚酰亞胺多孔質膜靜置，或移動所述聚酰亞胺多孔質膜以促進液體的流出，或者刺激部分表面，使細胞懸浮液被吸入所述膜中，和

使細胞懸浮液中的細胞保留在所述聚酰亞胺多孔質膜內，使水分流出，此處，所述細胞是動物細胞。

6.權利要求1或2所述的方法，其包括以下工序：

用細胞培養基或滅菌的液體潤濕所述聚酰亞胺多孔質膜的單面或兩面，

向所述潤濕的聚酰亞胺多孔質膜中裝填細胞懸浮液，和

使細胞懸浮液中的細胞保留在所述聚酰亞胺多孔質膜內，使水分流出，此處，所述細胞是動物細胞。

7.權利要求6所述的方法，其中，所述滅菌的液體為滅菌水或滅菌的緩沖液。

8.權利要求1或2所述的方法，其包括在細胞培養容器中裝入細胞培養基、細胞和1片或多片的所述聚酰亞胺多孔質膜，其中，聚酰亞胺多孔質膜處于懸浮在細胞培養基中的狀態。

9.權利要求8所述的方法，其特征在于，使用2片以上的所述聚酰亞胺多孔質膜的小片。

10.權利要求8所述的方法，其中，細胞與所述聚酰亞胺多孔質膜自發地粘接。

11.權利要求1或2所述的方法，其中，所述聚酰亞胺多孔質膜以如下方式在細胞培養容器中的細胞培養基中懸浮或固定：

i)折疊，

ii)卷成卷狀，

iii)將片或小片用線狀結構體連接，或

iv)系成繩狀。

12.權利要求11所述的方法，其中，細胞與所述聚酰亞胺多孔質膜自發地粘接。