[發明專利]神經元蠟樣脂褐質沉積癥的基因治療

在審

• 申請號: 201780043899.7
• 申請日: 2017-06-13
• 公開（公告）號: CN109475619A
• 公開（公告）日: 2019-03-15
• 發明（設計）人: 肯德里克·A·戈斯;杰弗里·B·帕森斯;阿西婭·吉尼亞圖林
• 申請（專利權）人: 藍鳥生物公司
• 主分類號: A61K39/21
• 分類號: A61K39/21;A61K48/00;A61P3/00;A61P25/00;A61P31/00;C12N7/01
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

1.一種多核苷酸，其包括：

(a)左(5′)慢病毒LTR；

(b)Psi(ψ)包裝信號；

(c)逆轉錄病毒輸出元件；

(d)中心多嘌呤區/DNA皮瓣(cPPT/FLAP)；

(e)與編碼三肽基肽酶1(TPP1)多肽的多核苷酸可操作地連接的啟動子；以及

(f)右(3′)慢病毒LTR。

2.根據權利要求1所述的多核苷酸，其中慢病毒選自由以下組成的群組：HIV(人類免疫缺陷病毒；包含HIV 1型和HIV 2型)；維斯納-梅迪病毒(VMV)；山羊關節炎-腦炎病毒(CAEV)；馬傳染性貧血病毒(EIAV)；貓免疫缺陷病毒(FIV)；牛免疫缺陷病毒(BIV)；以及猿猴免疫缺陷病毒(SIV)。

3.根據權利要求1或權利要求2所述的多核苷酸，其中所述慢病毒是HIV-1或HIV-2。

4.根據權利要求1到3中任一項所述的多核苷酸，其中所述慢病毒是HIV-1。

5.根據權利要求1到4中任一項所述的多核苷酸，其中所述5′LTR的啟動子用選自由以下組成的群組的異源啟動子替換：巨細胞病毒(CMV)啟動子、勞斯肉瘤病毒(RSV)啟動子和猿猴病毒40(SV40)啟動子。

6.根據權利要求1到5中任一項所述的多核苷酸，其中所述3′LTR包括一個或多個修飾。

7.根據權利要求1到6中任一項所述的多核苷酸，其中所述3′LTR包括防止病毒轉錄超出第一輪病毒復制的一個或多個缺失。

8.根據權利要求1到6中任一項所述的多核苷酸，其中所述3′LTR包括所述3′LTR的U3區域中TATA框以及Sp1和NF-κB轉錄因子結合位點的缺失。

9.根據權利要求1到6中任一項所述的多核苷酸，其中所述3′LTR是自身失活(SIN)LTR。

10.根據權利要求1到9中任一項所述的多核苷酸，其中所述與編碼TPP1多肽的多核苷酸可操作地連接的啟動子選自由以下組成的群組：整合素亞單元αM(ITGAM；CD11b)、CD68、C-X3-C基序趨化因子受體1(CX3CR1)、離子鈣結合銜接分子(IBA1)、跨膜蛋白119(TMEM119)、碎裂樣轉錄因子1(spalt like transcription factor 1)(SALL1)和粘附G蛋白偶聯受體E1(F4/80)。

11.根據權利要求1到9中任一項所述的多核苷酸，其中所述與編碼TPP1多肽的多核苷酸可操作地連接的啟動子包括骨髓增生性肉瘤病毒增強子、缺失的陰性對照區域、dl587rev引物結合位點取代的(MND)啟動子或其轉錄活性片段。

12.根據權利要求1到9中任一項所述的多核苷酸，其中所述與編碼TPP1多肽的多核苷酸可操作地連接的啟動子包括延伸因子1α(EF1α)啟動子或其轉錄活性片段。

13.根據權利要求1到9中任一項所述的多核苷酸，其中所述與編碼TPP1多肽的多核苷酸可操作地連接的啟動子是短EF1α啟動子。

14.根據權利要求1到9中任一項所述的多核苷酸，其中所述與編碼TPP1多肽的多核苷酸可操作地連接的啟動子是長EF1α啟動子。

15.根據權利要求1到14中任一項所述的多核苷酸，其中編碼所述TPP1多肽的所述多核苷酸是cDNA。

16.根據權利要求1到15中任一項所述的多核苷酸，其中編碼所述TPP1多肽的所述多核苷酸是經過優化用于表達的密碼子。