[發(fā)明專利]E-選擇素配體的糖工程化

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201780043863.9
• 申請日: 2017-05-22
• 公開（公告）號: CN109983119A
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發(fā)明（設計）人: 羅伯特·薩克斯坦
• 申請（專利權）人: 羅伯特·薩克斯坦
• 主分類號: C12N5/077
• 分類號: C12N5/077;C12N5/078;C12N5/0784;C12N5/0797;A61K35/28;A61K35/17;A61P29/00;A61P37/00;A61P9/00;A61P35/00;A61P3/00
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 張小勇

1.一種增強E-選擇素和/或L-選擇素配體在細胞表面上的表達的方法，所述方法包括以下步驟：

向細胞提供編碼糖基轉移酶的核酸，和

在足以表達糖基轉移酶的條件下培養(yǎng)細胞，其中表達的糖基轉移酶修飾細胞的糖蛋白上存在的末端唾液酸化的乳糖胺以增強E-選擇素和/或L-選擇素配體的表達。

2.權利要求1的方法，其中糖基轉移酶是α1,3-巖藻糖基轉移酶。

3.權利要求2的方法，其中α1,3-巖藻糖基轉移酶是α1,3-巖藻糖基轉移酶FTIII、FTIV、FTV、FTVI、FTVII及其組合。

4.權利要求2的方法，其中糖基轉移酶在細胞內(nèi)修飾末端唾液酸化的乳糖胺。

5.一種使得細胞能夠與E-選擇素和/或L-選擇素結合和/或增加細胞與E-選擇素和/或L-選擇素的結合的方法，所述方法包括以下步驟：

向細胞提供編碼α1,3-巖藻糖基轉移酶的核酸，和

在足以通過細胞表達α1,3-巖藻糖基轉移酶的條件下培養(yǎng)細胞；

其中α1,3-巖藻糖基轉移酶修飾糖蛋白上存在的聚糖鏈以產(chǎn)生E-選擇素和/或L-選擇素配體和從而使得細胞能夠與E-選擇素和/或L-選擇素結合和/或增加細胞與E-選擇素和/或L-選擇素的結合。

6.權利要求5的方法，其中細胞是哺乳動物細胞。

7.權利要求6的方法，其中哺乳動物細胞是人細胞。

8.權利要求5的方法，其中細胞是干細胞。

9.權利要求8的方法，其中干細胞選自胚胎干細胞、成體干細胞、造血干細胞和誘導的多能干細胞(iPSC)。

10.權利要求9的方法，其中成體干細胞是間充質(zhì)干細胞。

11.權利要求5的方法，其中通過轉染將核酸提供給細胞。

12.權利要求5的方法，其中通過轉導將核酸提供給細胞。

13.權利要求5的方法，其中核酸選自DNA、RNA、DNA/RNA雜合體、cDNA、mRNA、其修飾形式及其組合。

14.權利要求13的方法，其中核酸是經(jīng)修飾的RNA。

15.權利要求14的方法，其中經(jīng)修飾的RNA是modRNA。

16.權利要求5的方法，其中α1,3-巖藻糖基轉移酶是人α1,3-巖藻糖基轉移酶。

17.權利要求5的方法，其中α1,3-巖藻糖基轉移酶是人FTVI。

18.權利要求5的方法，其中α1,3-巖藻糖基轉移酶使選自PSGL-1、CD43、CD44及其組合的糖蛋白巖藻糖基化。

19.一種增加被移植入受試者的細胞群的歸巢和/或外滲的方法，所述方法包括以下步驟：

向細胞群提供編碼α1,3-巖藻糖基轉移酶的核酸，

在足以通過細胞群內(nèi)的一個或多個經(jīng)修飾的細胞表達α1,3-巖藻糖基轉移酶的條件下培養(yǎng)細胞群，其中α1,3-巖藻糖基轉移酶使糖蛋白上存在的聚糖鏈巖藻糖基化以產(chǎn)生其中E-選擇素和/或L-選擇素配體表達得到增強的經(jīng)修飾的細胞；和

將細胞群移植入受試者，其中具有增強的E-選擇素和/或L-選擇素配體表達的經(jīng)修飾的細胞顯示出向治療上有用的部位的增加的歸巢和/或外滲。

20.權利要求19的方法，其中細胞群是哺乳動物細胞群。