[發明專利]具有窄熒光發射的氫化卟啉珠粒

在審

• 申請號: 201780043650.6
• 申請日: 2017-06-12
• 公開（公告）號: CN109563532A
• 公開（公告）日: 2019-04-02
• 發明（設計）人: J·B·皮特納;R·B·埃文斯-斯托姆斯;D·A·奧爾森
• 申請（專利權）人: 尼爾瓦納科學股份有限公司
• 主分類號: C12Q1/00
• 分類號: C12Q1/00;C07D487/22;G01N21/64
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 左路;林曉紅

提供具有聚合物基質和與其締合的至少一種卟啉大環的熒光微粒和/或納米顆粒。在一些實施方式中，與本發明公開的熒光微粒和/或納米顆粒相關的卟啉大環選自：卟啉(包括17,18?didehydrophorbines)，二氫卟酚(包括phorbines)，菌綠素(包括bacteriophorbines)和異菌綠素(包括含有稠合“E”環的異菌綠素)。在一些實施方式中，卟啉大環具有選自式I和II的結構。還提供了由多種不同的熒光微粒和/或納米顆粒組成的群，制備方法和使用它們的方法，可分別檢測的熒光微粒和/或納米顆粒的組和制備和使用它們的方法，包含卟啉大環的，與顆粒綴合的二合體，及其使用方法來校準多激光流式細胞儀，對準和/或校準共聚焦熒光顯微鏡，和/或差異標記細胞和/或其他生物分子，和生物分子如抗體，其片段和衍生物(其與本發明公開的熒光微粒和/或納米顆粒共價綴合的，和/或與本發明公開的包含卟啉大環的二合體共價綴合的)。

相關申請的交叉引用

本申請要求2016年6月10日提交的美國臨時專利申請序列號62/348,532的權益，其公開內容通過引用整體并入本文。

技術領域

本發明公開的主題涉及包含一種或多種卟啉大環，任選地一種或多種二氫卟酚(chlorins)，菌綠素(bacteriochlorins)和/或異菌綠素(isobacteriochlorins)的組合物，以及使用其標記和/或以其檢測生物分子和/或細胞的方法。具體地說，涉及包含本發明公開的卟啉大環，分子和載體如納米顆粒和微粒(其已經用本發明公開的卟啉大環標記)的組合物，以及使用其標記和/或檢測靶的方法。

背景技術

基于熒光的多色流式細胞儀(PFC)是現代免疫學和生命科學研究中的關鍵分析技術。PFC特別適用于真核細胞的分析和免疫表型分析，用于研究和診斷目的，它使免疫細胞亞群和功能的分析越來越復雜。最初由20世紀80年代艾滋病病毒研究的需求驅動，它從早期的三色T細胞亞群測量(CDC，1982)發展到HIV陽性患者(其中疾病進展，細胞譜系，和疫苗應答因子全部可用PFC檢測(Chattopadhyay&Roederer，2010))的復雜多標記研究。除免疫疾病外，PFC的臨床應用包括白血病和淋巴瘤免疫表型分型(現在使用8-10種顏色；參見例如，Craig&Foon,2008；Peters&Ansari,2011)和用于移植交叉匹配的HLA分型。

對更高復用能力的需求不斷增加，再加上光學和激光的改進，推動了新的高參數流式細胞儀的推出，包括Becton Dickinson的50色FACSYMPHONY^TM品牌高速細胞分析儀和Bio-Rad的28色ZE5^TM品牌細胞分析儀。然而，這些和以前儀器上的PFC多路復用能力目前受到現有染料的寬光譜帶寬的阻礙，導致寬的和重疊的發射譜，這嚴重限制了這些新器件充分利用的功能的能力。廣泛和重疊的發射減少了可由給定激光器分析的光譜可分辨顏色的數量。用于PFC的當前染料需要使用次優帶通濾波器，預分析實驗和補償(重疊校正)。這些實踐導致熒光靈敏度降低并產生諸如“擴散”之類的偽影。例如，即使使用原型50色儀器，領先的PFC研究人員也只能實現30參數面板(Chattopadhyay等，2015)。因此，迫切需要用于高參數PFC板的新染料，用于諸如但不限于疫苗和藥物開發，傳染病研究和腫瘤學的領域。特別地，不僅存在對至少二十(20)個或更多個新熒光團的需求，同時且不斷增加的對新的非常窄的發射，光譜上不同的熒光團的需要。

發明內容

該發明內容列出了本公開主題的若干實施方式，并且在許多情況下列出了這些實施方式的變型和替換。該發明內容僅僅是眾多不同的示例實施方式。提及給定實施方式的一個或多個代表性特征同樣是示例性的。這樣的實施方式通常可以存在或不存在所提及的特征；同樣地，這些特征可以應用于本公開主題的其他實施方式，無論是否在本概述中列出。為避免過度重復，本概述未列出或建議此類功能的所有可能組合。