[發(fā)明專利]人多能干細(xì)胞衍生的功能性β細(xì)胞的體外產(chǎn)生有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201780038877.1 | 申請(qǐng)日： | 2017-06-14 |
| 公開(kāi)（公告）號(hào)： | CN109415693B | 公開(kāi)（公告）日： | 2023-03-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | S.瑞克;A.瑞扎尼雅 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 詹森生物科技公司 |
| 主分類號(hào)： | C12N5/071 | 分類號(hào)： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 中國(guó)專利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人： | 彭昶;黃希貴 |
| 地址： | 美國(guó)賓夕*** | 國(guó)省代碼： | 暫無(wú)信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 多能 干細(xì)胞 衍生 功能 細(xì)胞 體外 產(chǎn)生 | ||
1.一種表達(dá)單激素胰島素、PDX1、NKX6.1和MAFA的胰腺β細(xì)胞的體外群體，其通過(guò)在補(bǔ)充有UNC0638、UNC0642、UCN0646、TC-E5003、A366、PF03814735、ZM447439、SB747651A、PFI1、LY303511、MS436、AZT、DEZA、吡咯沙敏、CI994和MC1568中的一種或多種的培養(yǎng)基中培養(yǎng)胰腺內(nèi)分泌細(xì)胞獲得。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外群體，其中所述培養(yǎng)基還補(bǔ)充有肝素、N-乙酰半胱氨酸、表XII中定義的制劑I、以及T3、T4、Sobertirome、3,5-二碘甲狀腺丙酸、KB-141、MB07344和T0681中的一種或多種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的體外群體，其中所述培養(yǎng)基不含ALK5抑制劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的體外群體，其中所述培養(yǎng)基補(bǔ)充有T3。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外群體，其中所述培養(yǎng)基補(bǔ)充有ZM447439、肝素、N-乙酰半胱氨酸、表XII中定義的制劑I、以及T3、T4、Sobertirome、3,5-二碘甲狀腺丙酸、KB-141、MB07344和T0681中的一種或多種，并且其中所述培養(yǎng)基不包含ALK5抑制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外群體，其中所述培養(yǎng)基補(bǔ)充有T3。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的體外群體，其中所述培養(yǎng)基補(bǔ)充有AZT。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的體外群體，其中所述培養(yǎng)基補(bǔ)充有DEZA。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外群體，其中所述細(xì)胞還表達(dá)UCN3和SLC2A1。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外群體，其中所述細(xì)胞表現(xiàn)出葡萄糖刺激的胰島素分泌和葡萄糖依賴性線粒體呼吸。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述的體外群體，其中所述葡萄糖刺激的胰島素分泌和葡萄糖依賴性線粒體呼吸與胰島細(xì)胞的類似。
12.一種使多能干細(xì)胞分化成表達(dá)PDX1、NKX6.1、MAFA、UCN3和SLC2A的功能性β細(xì)胞的體外方法：
a.使多能干細(xì)胞分化成不成熟β細(xì)胞；以及
b.通過(guò)在補(bǔ)充有UNC0638、UNC0642、UCN0646、TC-E5003、A366、PF03814735、ZM447439、SB747651A、PFI1、LY303511、MS436、AZT、DEZA、吡咯沙敏、CI994和MC1568中的一種或多種的培養(yǎng)基中培養(yǎng)不成熟β細(xì)胞，使所述不成熟β細(xì)胞分化成表達(dá)PDX1、NKX6.1、MAFA、UCN3和SLC2A1的功能性β細(xì)胞。
13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的體外方法，其中所述功能性β細(xì)胞具有類似于人胰島細(xì)胞的葡萄糖依賴性線粒體呼吸。
14.根據(jù)權(quán)利要求12所述的體外方法，其中所述功能性β細(xì)胞具有類似于人胰島細(xì)胞的葡萄糖刺激的胰島素分泌。
15.根據(jù)權(quán)利要求12所述的體外方法，其中所述功能性β細(xì)胞以多相分泌胰島素。
16.根據(jù)權(quán)利要求12所述的體外方法，其中所述培養(yǎng)基還補(bǔ)充有肝素、N-乙酰半胱氨酸、表XII中定義的制劑I、以及T3、T4、Sobertirome、3,5-二碘甲狀腺丙酸、KB-141、MB07344和T0681中的一種或多種。
17.根據(jù)權(quán)利要求12或16所述的體外方法，其中所述培養(yǎng)基不含ALK5抑制劑。
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