[發(fā)明專利]polX家族的DNA聚合酶的變體在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201780037427.0 | 申請日: | 2017-06-13 |
| 公開(公告)號: | CN109477080A | 公開(公告)日: | 2019-03-15 |
| 發(fā)明(設計)人: | 托馬斯·伊貝爾特;馬克·德拉呂 | 申請(專利權)人: | DNA斯克瑞普特公司;巴斯德研究所;國家科學研究中心 |
| 主分類號: | C12N9/12 | 分類號: | C12N9/12;C12P19/34 |
| 代理公司: | 北京安信方達知識產權代理有限公司 11262 | 代理人: | 王瑋瑋;鄭霞 |
| 地址: | 法國*** | 國省代碼: | 法國;FR |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 變體 合成核酸分子 功能片段 核酸分子 核苷酸 聚合酶 模板鏈 位置處 殘基 修飾 突變 合成 | ||
1.一種polX家族的DNA聚合酶的變體或該聚合酶的功能片段的變體,所述聚合酶能夠在沒有模板鏈的情況下合成核酸分子,所述變體包含在選自由E457、T331、G332、G333、F334、R336、K338、H342、D343、V344、D345、F346、A397、D399、D434、V436、A446、L447、L448、G449、W450、G452、R454、Q455、F456、R458、R461、N474、E491、D501、Y502、I503、P505、R508、N509和A510組成的組的至少一個位置處的殘基或功能等同的殘基的至少一個突變,所示位置通過與SEQ ID NO:1比對確定。
2.根據(jù)權利要求1所述的polX家族的DNA聚合酶的變體,所述變體能夠合成DNA鏈和/或RNA鏈。
3.根據(jù)權利要求1或2所述的polX家族的DNA聚合酶的變體,所述變體為Pol IV、Polμ或末端脫氧核糖核苷轉移酶(TdT)的變體。
4.根據(jù)前述權利要求之一所述的polX家族的DNA聚合酶的變體,所述變體與根據(jù)SEQID NO:1的序列具有至少60%的同一性,優(yōu)選地與根據(jù)SEQ ID NO:1的序列具有至少70%、80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、99%的同一性。
5.根據(jù)前述權利要求之一所述的polX家族的DNA聚合酶的變體,其中至少一個突變由一個或更多個氨基酸殘基的取代、缺失或添加組成。
6.根據(jù)前述權利要求之一所述的polX家族的DNA聚合酶的變體,所述變體包含在選自由T331、G332、G333、F334、R336、D343、L447、L448、G449、W450、G452、R454、Q455、E457、R461和R508組成的組的至少一個位置處的殘基或功能等同的殘基的至少一個突變,優(yōu)選地在選自由R336、R454和E457組成的組的至少一個位置處的殘基或功能等同的殘基的至少一個突變,所示位置通過與SEQ ID NO:1比對確定。
7.根據(jù)前述權利要求之一所述的polX家族的DNA聚合酶的變體,所述變體包含在選自由R336、R454和E457組成的組的至少兩個位置處的殘基的至少一個突變,優(yōu)選地在所述三個位置R336、R454和E457處的殘基的突變。
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