[發明專利]HPV L2肽免疫原性的改善

有效

• 申請號: 201780035734.5
• 申請日: 2017-06-07
• 公開（公告）號: CN109310749B
• 公開（公告）日: 2022-09-23
• 發明（設計）人: 安杰洛·博爾基;馬丁·穆勒;西蒙·奧托內洛;索馬伊·普亞弗德;格洛麗亞·斯帕尼奧利
• 申請（專利權）人: 德國癌癥研究中心
• 主分類號: A61K39/12
• 分類號: A61K39/12;C07K14/005
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 張瑩;高麗娜

本發明涉及一種免疫原性多肽，其包含許多與HPV16的L2多肽的氨基酸20?50對應的人乳頭瘤病毒(HPV)L2N?端肽，其中所述HPV L2N?端肽是來自至少兩種不同HPV基因型的L2N?端肽。本發明也涉及用于用在藥物中和用于用在對抗HPV感染的疫苗接種中的所述免疫原性多肽。此外，本發明涉及編碼所述免疫原性多肽的多核苷酸和包含它們的宿主細胞。此外，本發明涉及與本發明的免疫原性多肽有關的試劑盒、方法和用途。

本發明涉及一種免疫原性多肽，其包含許多與HPV16的L2多肽的氨基酸20-50對應的人乳頭瘤病毒(HPV)L2 N-端肽，其中所述HPV L2 N-端肽是來自至少兩種不同HPV基因型的L2 N-端肽。本發明也涉及用于用在藥物中和用于用在對抗HPV感染的疫苗接種中的所述免疫原性多肽。此外，本發明涉及編碼所述免疫原性多肽的多核苷酸和包含它們的宿主細胞。此外，本發明涉及與本發明的免疫原性多肽有關的試劑盒、方法和用途。

宮頸癌是世界上女性的第二最常見的癌癥。臨床和分子研究已經證實，某些類型的人乳頭瘤病毒(HPV)(被稱作高危類型)是該疾病的病原。兩種用于預防宮頸癌的抗-HPV疫苗最近已經被Merck(Gardasil^TM)和GlaxoSmithKline(Cervarix^TM)批準(Schmiedeskamp等人,(2006),Ann Pharmacother,40:1344-1352)。兩種疫苗依賴于呈病毒樣顆粒(VLP)形式的主要衣殼蛋白L1作為抗原(Roden等人,(2006),Nat Rev Cancer,6:753-763)；它們會保護免于L1-VLP的來源HPV類型，但是對除了最密切相關的HPV類型以外的全部類型在很大程度上是無效的。兩種最突出的高危HPV類型16和18是兩種疫苗的主要靶標，盡管存在對HPV類型31和45的部分交叉保護的證據(綜述見Muller和Gissmann,(2007),Dis Markers,23:331-336；Huh和Roden,(2008),Gynecol Oncol,109:S48-56)。基于L1的疫苗的有限交叉保護能力(這是開發改進的疫苗接種策略的持續努力的主要原因)可能反映了L1中和表位的HPV類型特異性(Giroglou等人,(2001),Vaccine,19:1783-1793)。

針對次要衣殼蛋白L2的抗體也會中和HPV感染，且經常能夠交叉中和多種非同源病毒粒子，盡管具有不同的效能(Kondo等人(2007),Virology,358:266-272；Gambhira,R.,(2007),J Virol,81:13927-13931)。L2的N-端區域與靶細胞表面上的迄今未鑒別的第二受體相互作用(Yang等人(2003),JVirol,77:3531-3541)，并且該相互作用可以被抗-L2抗體阻斷。參與HPV-細胞表面相互作用的L2區域的精確身份仍然是討論的主題。這最初被提議為包含氨基酸(aa)108-120的區域，且靶向該特定L2區域的抗體實際上被證實會在體外阻斷病毒感染，盡管在低滴度(Kawana等人(2001),Vaccine,19:1496-1502；Kawana等人(2001b),J Virol,75:2331-2336)。隨后的實驗鑒別了氨基酸1-88區域(Pastrana等人(2005),Virology,337:365-372)以及在包含氨基酸11-200和氨基酸18-144的更延長的N-端區域(Kondo在上述引文中)中的另外的中和表位。這些N-端表位中的最顯著者可能是位于氨基酸17-36之間的一個。這被鑒別為HPV16中和性和保護性單克隆抗體(RG-1)的靶標以及在血清中發現的中和活性的主要決定簇，所述血清來自用L2的延長形式(氨基酸1-88、11-200或全長蛋白)免疫的兔和人類(Gambhira,2007,在上述引文中)。由于已經發現L2氨基酸18和19或氨基酸20和21的突變會破壞L2與細胞表面的結合和病毒感染(Yang,R.,等人(2003),J.Virol.77:3531-3541)，結論是，由RG-1抗體識別的表位與HPV16 L2的表面結合基序重疊。