[發明專利]離體BITE激活的T細胞

在審

• 申請號: 201780035722.2
• 申請日: 2017-04-12
• 公開（公告）號: CN109789195A
• 公開（公告）日: 2019-05-21
• 發明（設計）人: 胡安·安東尼奧·巴萊斯特羅斯諾貝樂;特里沙·安·本奈特;皮勒·赫爾南德斯坎波;克里斯蒂娜·戈麥茲岡薩雷茲;胡里安·高羅沙蒂格吉倫;杰奎因·馬丁內茲洛佩茲;艾里西亞·羅伯里斯馬蒂奧斯;丹尼爾·普里默拉莫斯
• 申請（專利權）人: 維維雅生物技術公司
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 單驍越;張瑩

1.產生癌癥殺傷T細胞或癌癥殺傷T細胞制劑的體外方法，其包括：

(a)提供包含來自患有癌癥的受試者的至少一個T細胞的樣品；

(b)提供包含至少一個癌細胞的樣品；

(c)在足以允許所述至少一個T細胞從所述至少一個癌細胞獲得細胞表面標志物的條件和時間下，形成包含所述至少一個T細胞，所述至少一個癌細胞和鄰近免疫輔導因子(pICF)的離體反應混合物，由此產生至少一個癌癥殺傷T細胞；以及

(d)以下體外步驟中的一個，二個，三個或全部：

i)擴增來自(c)的癌癥殺傷T細胞；

ii)選擇來自(c)的癌癥殺傷T細胞；

iii)富集來自(c)的癌癥殺傷T細胞；或

iv)純化來自(c)的癌癥殺傷T細胞。

2.權利要求1的方法，其中pICF在所述制劑中以按重量計0.005％-10％的濃度存在。

3.權利要求1或2中任一項的方法，其中pICF具有提供對所述T細胞的親和力的第一元件和對所述癌細胞具有親和力的第二元件，其中所述第一元件結合T細胞并且不結合實質數量的癌細胞，并且其中所述第二元件結合癌細胞并且不結合實質數量的T細胞。

4.權利要求3的方法，其中所述結合T細胞的第一元件包括下列細胞受體中的一種或多種：CD8，CD3，CD4，α/βT細胞受體(TCR)，CD45RO和/或CD45RA。

5.權利要求3的方法，其中所述第二元件結合以下中的一種或多種：CD20，CD30，CD33，CD52，EpCAM，CEA，gpA33，黏蛋白，TAG-72，碳酸酐酶IX，PSMA，葉酸結合蛋白，選自GD2，GD3，或GM2的神經節苷脂，Lewis-Y2，VEGF，VEGFR，αVβ3，α5β1，ErbB1/EGFR，ErbB2/HER2，ERbB3，c-MET，IGF1R，EphA3，TRAIL-R1，TRAIL-R2，RANKL，FAP，生腱蛋白，CD123，CD19，或BCMA。

6.權利要求1-5中任一項的方法，其中pICF包含選自以下的雙特異性抗體分子：雙特異性免疫球蛋白(BsIgG)，與另外的抗原結合分子可操作地連接的免疫球蛋白，包含通過選自雙親和性重靶向(DART)抗體片段或雙特異性T細胞銜接子(BiTE)的接頭可操作地連接的兩個或更多個scFv片段的雙特異性抗體(BsAb)片段，雙特異性融合蛋白或BsAb綴合物。

7.權利要求1-6中任一項的方法，其中pICF是選自由以下組成的列表的雙特異性抗體：BsMAb CD123/CD3，BsMAb CD19/CD3和EpCAM/CD3。

8.權利要求1-7中任一項的方法，其中所述癌癥殺傷T細胞的擴增包括將癌癥殺傷T細胞的數量增加2倍至10⁶倍或更多。

9.權利要求1-8中任一項的方法，其中所述癌癥殺傷T細胞的選擇或其制備基于選自以下中的一個或多個的參數：增加的癌細胞殺傷活性，降低的毒性，降低的脫靶效應，增加的生存力，增加的增殖，或有效E∶T比率。

10.權利要求1-9中任一項的方法，其中所述選擇和/或富集步驟(d)包括：使用經熒光標記的化合物，所述經熒光標記的化合物結合i)一種或多種癌癥抗原，或擴散到癌細胞膜中或ii)激活的T細胞的一種或多種標志物，或i)和ii)兩者；或者使用涂覆有抗體或其片段的珠，所述抗體或其片段結合i)一種或多種癌癥抗原或ii)激活的T細胞的一種或多種標志物，或i)和ii)兩者。

11.權利要求10的方法，其中所述癌癥殺傷T細胞制劑包含胞啃癌癥殺傷T細胞，其濃度為所述制劑中細胞總數的至少50％。