[發明專利]免疫層析檢測方法

在審

• 申請號: 201780030159.X
• 申請日: 2017-07-12
• 公開（公告）號: CN109154605A
• 公開（公告）日: 2019-01-04
• 發明（設計）人: 西谷公良;落合泰史
• 申請（專利權）人: 積水醫療株式會社
• 主分類號: G01N33/531
• 分類號: G01N33/531;G01N33/543
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 吳小明

本發明所要解決的問題是提供一種抑制在免疫層析檢測方法中糞便特有的非特異性反應的方法，在該免疫層析檢測方法中在不溶性膜中展開糞便樣品以檢測樣品中的分析物。已經發現，通過使用在分子中具有兩個以上羧基的化合物，可以抑制由糞便樣品引起的非特異性反應以準確地檢測糞便樣品中的分析物。特別地，已經發現，通過將含有在分子中具有兩個以上羧基的化合物的樣品稀釋液用于本發明，對于嬰兒的糞便樣品可以抑制無法通過常規方法抑制的非特異性反應，從而完成本發明。

技術領域

本發明涉及在檢測糞便樣品(源自糞便的樣品)的免疫層析方法中抑制非特異性反應的方法，以及該方法中使用的檢測試劑盒和樣品稀釋液。

背景技術

使用免疫層析的檢測方法由于高特異性和靈敏度以及便捷性而得到廣泛使用。應用于該檢測方法的樣品的實例包括尿、糞便、唾液、血、血漿等，其適于用作臨床測試樣品并廣泛用作可用于診斷的樣品。

特別地，為了使用糞便作為樣品以通過使用免疫層析檢測包含在其中的分析物，必須盡可能多地消除直接干擾經免疫層析的樣品展開的物質和盡管在缺少分析物時仍如存在分析物一樣引起反應(即所謂的非特異性反應)的物質的影響。

通常已知明膠、酪蛋白、牛血清白蛋白、合成聚合物等是用于消除非特異性反應的封閉劑，并且已知允許這些試劑共存于使用免疫層析的反應系統的方法(專利文件1和2)。

然而，這些試劑實際上對由糞便樣品引起的非特異性反應的抑制是否起作用是未知的。

專利文件3描述了在使用糞便作為樣本的情況下的問題，即使用糞便作為樣本的檢測(通過ELISA等)導致低靈敏度，并且常常引起非特異性反應，這使得難以判定結果。該文件公開了通過使用pH 9.0至10.0的樣本稀釋液抑制非特異性反應的方法，以解決該問題并且通過使用免疫層析檢測諾如病毒(norovirus)或札幌病毒。但是該方法在處理方面存在問題，因為將樣品稀釋液制備于堿性一側是必須的，這對于樣本稀釋液并不常見。

專利文件4公開了通過用含有有機酸(如檸檬酸)和表面活性劑的樣本預處理液預處理生物樣品來增強免疫反應的檢測靈敏度的方法。

盡管糞便包括在生物樣品長列表中，但是實例中確認的那些是流感患者的鼻涕或咽拭子，并且檢測方法不是使用免疫層析的方法。

如上所述，在通過使用免疫層析檢測糞便樣品中的分析物的方法中，尚未建立用于抑制由糞便樣品引起的非特異性反應的方法的技術。

引用文獻列表

專利文獻

專利文獻1：日本公開專利公開號2003-344406

專利文獻2：日本公開專利公開號2002-148266

專利文獻3：日本公開專利公開號2004-301684

專利文獻4：WO 02/010744

發明內容

技術問題

本發明所要解決的問題是提供一種抑制在免疫層析檢測方法中糞便特有的非特異性反應的方法，在該免疫層析檢測方法中在不溶性膜中展開糞便樣品以檢測樣品中的分析物。

問題的解決方案

作為解決該問題的深入研究的結果，本發明人已經發現，通過使用在分子中具有兩個以上羧基的化合物，可以抑制由糞便樣品引起的非特異性反應以準確地檢測糞便樣品中的分析物。

特別地，本發明人已經發現，通過將含有在分子中具有兩個以上羧基的化合物的樣品稀釋液用于本發明，可以抑制對于嬰兒的糞便樣品無法通過常規方法抑制的非特異性反應，從而完成本發明。

因此，本發明具有以下配置。