[發明專利]重組卵泡抑素-FC融合蛋白及其在治療杜氏肌營養不良癥中的應用

在審

• 申請號: 201780025363.2
• 申請日: 2017-03-03
• 公開（公告）號: CN109153708A
• 公開（公告）日: 2019-01-04
• 發明（設計）人: A·伊斯肯德瑞安;A·W·諾頓;C·沈;C·潘
• 申請（專利權）人: 夏爾人類遺傳性治療公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;A61P21/00;A61K38/17;A61K38/22
• 代理公司: 北京商專永信知識產權代理事務所(普通合伙) 11400
• 代理人: 鄔玥;方挺

本發明尤其提供了用于治療肌營養不良癥特別是杜氏肌營養不良癥(DMD)的方法和組合物。在一些實施方案中，根據本發明的方法包括向患有或易患DMD的個體施用有效量的重組卵泡抑素融合蛋白，使得DMD的至少一種癥狀或特征在強度、嚴重性或頻率上減少或具有延遲的發作。

相關申請

本申請要求2016年3月4日提交的臨時申請U.S.S.N.62/303,954的權益，其全部內容通過引用并入本文。

背景技術

杜氏肌營養不良癥(DMD)是一種X連鎖隱性遺傳疾病，影響估計1：3600名男性出生，并且估計全世界有50,000名受影響的個體。這種疾病的特征是肌肉逐漸消瘦，并且受影響的兒童在達到13歲時要靠輪椅生活。受影響的個體通常在3歲時出現癥狀，這些個體的中位生存期在25至30歲之間。由于膈肌無力和心肌病引起的呼吸衰竭是常見的死亡原因。

DMD是由肌營養不良蛋白基因突變引起的。肌營養不良蛋白基因位于X染色體上并編碼肌營養不良蛋白。肌營養不良蛋白負責通過肌營養不良蛋白聚糖復合物將肌纖維的收縮機制(肌動蛋白-肌球蛋白復合物)與周圍的細胞外基質連接。肌營養不良蛋白基因的突變導致肌營養不良蛋白的改變或缺失以及異常的肌纖維膜功能。雖然雄性和雌性都可以攜帶肌營養不良蛋白基因的突變，但雌性很少受到DMD的影響。

DMD的一個特征是受影響組織的缺血。缺血是對組織或器官的血液供應的受限或減少，這導致缺乏細胞代謝所需的氧氣和營養物質。局部缺血通常由血管收縮或阻塞引起，導致組織或器官的損傷或功能障礙。缺血的治療旨在增加到達受影響的組織或器官的血流量。

目前，沒有治愈DMD的方法。已經研究了幾種治療途徑，包括基因治療和皮質類固醇給藥，但DMD患者仍然存在對替代品的需求。

發明內容

本發明尤其提供了基于施用重組卵泡抑素-Fc融合蛋白治療DMD的改進方法和組合物。本發明尤其包括以下出人意料的觀察結果：卵泡抑素多肽中的某些氨基酸修飾導致改善的卵泡抑素蛋白，其以高親和力特異性靶向肌生長抑制素和活化素A，并且不以有意義的親和力結合非靶BMP或肝素。預期肌生長抑制素和激活素A對Smad2/3途徑的激活導致肌原蛋白表達的抑制，和從而導致成肌細胞不分化成肌肉。因此，肌生長抑制素和激活素是用于刺激肌肉再生的可行靶標。然而，由于某些結構相似性，肌生長抑制素和激活素拮抗劑包括卵泡抑素可以結合骨形態發生蛋白(BMP)。BMP，特別是BMP-9和BMP-10，是關鍵的形態發生信號，其協調整個身體內的組織結構。抑制這種BMP可能導致不希望的病理狀況。卵泡抑素還通過三個FS結構域中的第一個中的堿性肝素結合序列(HBS)與細胞表面硫酸乙酰肝素蛋白多糖結合。預期肝素結合的失活、減少或調節可增加卵泡抑素的體內暴露和/或半衰期。因此，本發明提供了改進的卵泡抑素，其具有更長的半衰期并且更有效用于DMD的有效治療。

在一個方面，本發明提供了重組卵泡抑素多肽，其包含與SEQ ID NO：1、SEQ IDNO：2、SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：5至少80％相同的氨基酸序列，其中重組卵泡抑素蛋白具有肝素結合結構域(HBS)，并且其中HBS內的一個或多個氨基酸被與取代的氨基酸相比具有較少正電荷的氨基酸取代。在一個實施方案中，HBS內的一個或多個氨基酸被具有中性電荷的氨基酸取代。在一個實施方案中，HBS內的一個或多個氨基酸被具有負電荷的氨基酸取代。在一個實施方案中，所述一個或多個氨基酸包括至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個氨基酸。在一個實施方案中，所述一個或多個氨基酸包括3個氨基酸。在一個實施方案中，與天然存在的卵泡抑素相比，重組多肽具有降低的肝素結合親和力。在一個實施方案中，重組卵泡抑素蛋白不與BMP-9或BMP-10結合。在一個實施方案中，重組卵泡抑素蛋白具有與SEQ ID NO：12-40或SEQ ID NO：101-106中的任一個至少80％相同的序列。